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目的 检测过表达低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)对体外培养人视网膜血管内皮细胞(hu-man retinal capillary endothelial cell,HREC)增殖、炎症反应及血管生成的影响.方法 将体外培养HREC转染人工合成的pEG-FP-HIF-1α重组载体,并采用荧光定量PCR检测转染前后HREC中HIF-1α的表达变化.采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)、酶联免疫吸附实验(ELISA)和Western blot分别检测过表达HIF-1α对HREC增殖、炎症反应及血管生成的影响.结果 体外转染pEGFP-HIF-1α可显著增加HREC中HIF-1α mRNA和蛋白表达.过表达HIF-1α可显著促进HREC增殖,HREC转染pEG-FP-HIF-1α后24 h、48 h及72 h A值分别为:0.34 ± 0.04、0.57 ± 0.04、0.83 ± 0.05,而HREC转染pEGFP-C1后24 h、48 h及72 h A值分别为:0.26 ± 0.03、0.44 ± 0.04、0.61 ± 0.04,两者相比差异均有统计学意义(均为P<0.05).过表达HIF-1α可显著增加HREC中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-1β及IL-6的蛋白表达水平,TNF-α、IL-1β及IL-6蛋白表达分别为(2.63 ± 0.57)ng·L-1、(1.94 ± 0.41)ng·L-1、(5.32 ± 0.83)ng·L-1,而转染pEGFP-C1后HREC中TNF-α、IL-1β及IL-6蛋白表达分别为(1.20 ±

作者:蔡晖;石华宗;杨豫湘

来源:眼科新进展 2019 年 39卷 1期

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作者:
蔡晖;石华宗;杨豫湘
来源:
眼科新进展 2019 年 39卷 1期
标签:
低氧诱导因子-1α 过表达 人视网膜血管内皮细胞 增殖 炎症反应 血管内皮生长因子
目的 检测过表达低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)对体外培养人视网膜血管内皮细胞(hu-man retinal capillary endothelial cell,HREC)增殖、炎症反应及血管生成的影响.方法 将体外培养HREC转染人工合成的pEG-FP-HIF-1α重组载体,并采用荧光定量PCR检测转染前后HREC中HIF-1α的表达变化.采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)、酶联免疫吸附实验(ELISA)和Western blot分别检测过表达HIF-1α对HREC增殖、炎症反应及血管生成的影响.结果 体外转染pEGFP-HIF-1α可显著增加HREC中HIF-1α mRNA和蛋白表达.过表达HIF-1α可显著促进HREC增殖,HREC转染pEG-FP-HIF-1α后24 h、48 h及72 h A值分别为:0.34 ± 0.04、0.57 ± 0.04、0.83 ± 0.05,而HREC转染pEGFP-C1后24 h、48 h及72 h A值分别为:0.26 ± 0.03、0.44 ± 0.04、0.61 ± 0.04,两者相比差异均有统计学意义(均为P<0.05).过表达HIF-1α可显著增加HREC中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-1β及IL-6的蛋白表达水平,TNF-α、IL-1β及IL-6蛋白表达分别为(2.63 ± 0.57)ng·L-1、(1.94 ± 0.41)ng·L-1、(5.32 ± 0.83)ng·L-1,而转染pEGFP-C1后HREC中TNF-α、IL-1β及IL-6蛋白表达分别为(1.20 ±