目的 探讨微小RNA-24(miR-24)对过氧化氢(H2O2)诱导的HLE-B3细胞凋亡 的影响,分析其与线粒体中第二个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活因子/低等电位点的凋亡 抑制蛋白的直接结合蛋白(the second mitochondria-derived activator of caspase/direct IAP-binding protein with low PI,Smac/Diablo)-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系.方法 将 HLE-B3细胞分为对照组、H2O2组、H2O2+miR-24 NC组和H2O2+miR-24抑制剂组.先按照miR-24抑制剂、miR-24 NC试剂盒说明书转染H2O2+miR-24抑制剂组和H2O2+miR-24 NC 组细胞24 h,然后向 H2O2组、H2O2+miR-24 NC 组和 H2O2+miR-24抑制剂组 HLE-B3细胞中加入200 μmol·L-1 H2O2干预24 h,收集细胞用于后续实验;将正常培养的HLE-B3细胞设置为对照组.采用实时荧光定量PCR检测各组HLE-B3细胞miR-24表 达情况,CCK-8法检测各组HLE-B3细胞生长情况,用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,计算各组细胞存活率和细胞凋亡率.采用荧光探针JC-1法检测线粒体膜电位变化情况(利用红绿荧光强度比反映线粒体膜电位);采用蛋白免疫印迹法检测各组HLE-B3细胞线粒体和细胞质分级中Smac/Diablo及细胞质分级中XIAP、caspase-9和caspase-3蛋白表达情况.对所得数据进行统计学分析.结果 当H2O2浓度大于200 μm
作者:闫利霞;黄晓;张鑫;郑广瑛
来源:眼科新进展 2021 年 41卷 5期