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目的 探讨黄芪甲苷(AS-IV)对蓝光诱导损伤的视网膜色素上皮细胞的保护作用及其机制.方法 将传代后的ARPE-19细胞分为5组.空白组:在暗环境中培养细胞,不采用蓝光照射;光照组:采用辐射强度为(4.0±0.5)mW·cm-2的蓝光照射细胞4 h;光照+AS-IV组:采用相同辐射强度的蓝光照射4 h+50 mg·L-1 AS-IV培养细胞24 h;光照+AS-IV+siNC组:将细胞转染对照siRNA后,采用相同辐射强度蓝光照射4 h+50 mg·L-1 AS-IV培养细胞24 h;光照+AS-IV+siPINK1组:将细胞转染siPINK1后,采用相同辐射强度蓝光照射4 h+50 mg·L-1 AS-IV培养细胞24 h.采用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位,DHE荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)含量,Western blot检测蛋白表达.结果 当连续蓝光照射4 h以上,ARPE-19细胞存活率均低于80%,故选择照射时间为4 h进行后续实验.光照+AS-IV组细胞存活率明显高于光照组[(93.85±1.79)%、(79.24±3.25)%,t=11.141、P<0.001].光照+AS-IV组细胞凋亡率明显低于光照组[(11.03±1.65)%、(27.85±3.44)%,t=12.472、P<0.001].光照组细胞线粒体膜电位高于空白组(绿/红色荧光强度比值分别为1.72±0.25、0.58±0.07,t=12.418、P<0.001),但是光照+AS-IV组细胞线粒体膜电

作者:黎昌江;李秋慧;洪娟;陈方安;郭翠玲

来源:眼科新进展 2021 年 41卷 11期

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作者:
黎昌江;李秋慧;洪娟;陈方安;郭翠玲
来源:
眼科新进展 2021 年 41卷 11期
标签:
黄芪甲苷;视网膜色素上皮细胞;蓝光损伤;线粒体;活性氧
目的 探讨黄芪甲苷(AS-IV)对蓝光诱导损伤的视网膜色素上皮细胞的保护作用及其机制.方法 将传代后的ARPE-19细胞分为5组.空白组:在暗环境中培养细胞,不采用蓝光照射;光照组:采用辐射强度为(4.0±0.5)mW·cm-2的蓝光照射细胞4 h;光照+AS-IV组:采用相同辐射强度的蓝光照射4 h+50 mg·L-1 AS-IV培养细胞24 h;光照+AS-IV+siNC组:将细胞转染对照siRNA后,采用相同辐射强度蓝光照射4 h+50 mg·L-1 AS-IV培养细胞24 h;光照+AS-IV+siPINK1组:将细胞转染siPINK1后,采用相同辐射强度蓝光照射4 h+50 mg·L-1 AS-IV培养细胞24 h.采用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位,DHE荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)含量,Western blot检测蛋白表达.结果 当连续蓝光照射4 h以上,ARPE-19细胞存活率均低于80%,故选择照射时间为4 h进行后续实验.光照+AS-IV组细胞存活率明显高于光照组[(93.85±1.79)%、(79.24±3.25)%,t=11.141、P<0.001].光照+AS-IV组细胞凋亡率明显低于光照组[(11.03±1.65)%、(27.85±3.44)%,t=12.472、P<0.001].光照组细胞线粒体膜电位高于空白组(绿/红色荧光强度比值分别为1.72±0.25、0.58±0.07,t=12.418、P<0.001),但是光照+AS-IV组细胞线粒体膜电