目的 探讨碱基切除修复基因8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)对紫外线(UVB)诱导晶状体上皮细胞损伤(LEC)的保护作用.方法 通过UVB照射人LEC(SRA01/04细胞株)诱导细胞氧化损伤模型,利用siRNA敲降技术针对靶基因OGG1设计3个siRNA(分别为siOGG1#1、siOGG1#2和siOGG1#3).同时,为了验证出敲降效率最高的siOGG1,依据转染情况将细胞分为siOGG1#1组、siOGG1#2组、siOGG1#3组、siNC组和空白对照组(不转染).后续为了验证OGG1的表达下调对氧化损伤环境下细胞的作用,将细胞分为空白对照组、UVB组、UVB+siNC组和UVB+siOGG1#2组,观察各组细胞凋亡相关蛋白的表达变化.采用实时荧光定量-PCR检测各组细胞目的基因mRNA的表达,免疫印迹实验检测各组细胞相关蛋白的表达.免疫荧光法检测UVB+siNC组和UVB+si-OGG1#2组中受损DNA的标记物15A3的荧光强度变化.采用免疫荧光法检测细胞DNA氧化损伤情况,CCK8实验检测细胞活力.结果 实时荧光定量-PCR检测结果显示:UVB照射时间为10 min时,OGG1的相对表达量最高;免疫印迹实验检测结果显示:随着UVB照射时间的延长,细胞内OGG1蛋白相对表达量呈时间依赖性下降.因此,细胞氧化损伤模型采用UVB照射10 min处理细胞.实时荧光定量-PCR检测结果显示:与siNC组相比,靶向设计的转染siOGG1组的三个亚组中细

作者：李鹏飞；罗家伟；康丽华；张国伟；茅馨木；吴安然；张文怡；管怀进

来源：眼科新进展 2022 年 42卷 4期