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目的检测体外培养角膜上皮细胞Pax-6基因的表达,探讨维持角膜缘干细胞特性的基因因素.方法地高辛标记cDNA探针进行DNA印迹杂交和蛋白质免疫印迹,检测培养的角膜上皮细胞中Pax-6基因表达状况. 结果EcoR Ⅰ酶切角膜缘上皮细胞中9.1 kbp的DNA片断与探针序列相同,其中原位和原代培养细胞、传第l代明显测出,角膜中央上皮细胞的原位和原代细胞中也能测出.Western Blot发现抗血清11认识相对分子质量为81×103和55×103两种角膜上皮细胞蛋白;抗血清13认识60×103的角膜上皮细胞蛋白,原位和原代、传第1代角膜缘干细胞和角膜中央上皮细胞均能够测出,角膜缘传第3代细胞和角膜基质细胞不表达.结论角膜缘干细胞和角膜中央上皮细胞均具有Pax-6基因,该基因的正常表达是维持角膜上皮细胞特性的必要条件.

作者:潘志强;张文华

来源:眼科研究 2001 年 19卷 2期

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作者:
潘志强;张文华
来源:
眼科研究 2001 年 19卷 2期
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角膜上皮细胞 Pax-6基因 印迹分析
目的检测体外培养角膜上皮细胞Pax-6基因的表达,探讨维持角膜缘干细胞特性的基因因素.方法地高辛标记cDNA探针进行DNA印迹杂交和蛋白质免疫印迹,检测培养的角膜上皮细胞中Pax-6基因表达状况. 结果EcoR Ⅰ酶切角膜缘上皮细胞中9.1 kbp的DNA片断与探针序列相同,其中原位和原代培养细胞、传第l代明显测出,角膜中央上皮细胞的原位和原代细胞中也能测出.Western Blot发现抗血清11认识相对分子质量为81×103和55×103两种角膜上皮细胞蛋白;抗血清13认识60×103的角膜上皮细胞蛋白,原位和原代、传第1代角膜缘干细胞和角膜中央上皮细胞均能够测出,角膜缘传第3代细胞和角膜基质细胞不表达.结论角膜缘干细胞和角膜中央上皮细胞均具有Pax-6基因,该基因的正常表达是维持角膜上皮细胞特性的必要条件.