背景 调节性容积回缩(RVD)现象在生物界各种细胞中普遍存在,它不仅与细胞容积的稳定性相关,还参与多种细胞的生理功能和病理过程,但迄今为止,关于晶状体上皮细胞(LECs)的RVD机制研究仍较少. 目的 观察低渗刺激下人LECs系HLE B-3细胞株RVD的过程,并探讨其可能的作用机制及影响因素. 方法 应用氢离子缓冲剂(HEPES)将林格液分别配成质量分数45%、35%、25%和15%的低渗液(实际渗透压分别为165、195、225和255 mOsm/kg),用NaOH将pH值调至7.4或6.8.HLE B-3在含质量分数10%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培养基中进行体外培养,待细胞贴壁后稳定生长时,将HLE B-3细胞置于特制的培养板内,分别用不同质量分数的低渗林格液灌流培养,观察其对细胞RVD的影响.以45%低渗林格液刺激细胞作为对照组,通过Cl-、K+通道阻断剂干预,分别用无HCO3、无Ca2+、无Cl-或高K+林格液灌流改变细胞外液离子成分或酸化溶液pH,在Image-Pro Plus 6.0图像处理软件控制下实现时滞拍摄固定视野内的活细胞图像,分析细胞RVD的动态变化.结果 在低渗刺激下细胞容积膨胀,随后即出现了RVD过程.45%低渗林格液刺激细胞产生RVD为(59.1±7.8)%,随着林格液渗透压的逐渐降低,细胞容积逐渐膨胀,细胞的RVD能力逐渐增强,细胞最大膨胀容积与RVD存在S形正相关(r=
作者:庄晓东;翁景宁
来源:中华实验眼科杂志 2013 年 31卷 4期