背景 年龄相关性黄斑变性(AMD)的发病与视网膜色素上皮(RPE)细胞的衰老有关,寻求抗RPE细胞衰老的药物对AMD的防治有重要意义.研究表明枸杞多糖(LBP)有延缓衰老的作用,但其对RPE细胞衰老的作用机制尚不完全明确. 目的 研究LBP对体外培养的人RPE细胞的吞噬功能、清除脂褐素的功能及细胞增生活性的影响,探讨LBP防治AMD的可行性.方法 分离猪视网膜神经上皮层,密度梯度离心法提取猪眼光感受器外节(POS),并用异硫氰酸荧光素(FITC)标记,然后分别加入含0.01、0.10、1.00 g/LLBP的人RPE中培养24 h,荧光显微镜下测量正常对照组、POS对照组及各质量浓度LBP+POS组人RPE细胞吞噬POS的荧光面积,评估LBP对人RPE细胞吞噬功能的影响.将密度为5×104个/ml的人RPE细胞与猪POS混合培养3周以建立POS诱导的脂褐素模型,然后将模型细胞分别加入含上述质量浓度LBP的培养液中,用流式细胞术定量检测人RPE细胞内脂褐素的自发荧光值(A),观察LBP对人RPE细胞清除脂褐素功能的影响.对脂褐素化的人RPE细胞进行培养后分别加入含有上述不同质量浓度LBP的培养液,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定培养24、48和72 h后各组细胞生长的增生值(A). 结果 光学显微镜下可见猪POS呈大小均一、排列整齐、独立的细杆状形态,透射电子显微镜下可见双层膜
作者：杜秀娟；董卫红；毕宏生；解孝锋
来源：中华实验眼科杂志 2013 年 31卷 8期
