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背景 有多种因素参与年龄相关性黄斑变性(AMD)的发病,其中视网膜色素上皮(RPE)细胞的氧化应激损伤与AMD的发病密切相关.实验和临床研究表明,辅酶Q10是一种强抗氧化剂,探讨其对人RPE细胞的氧化应激损伤是否有保护作用对于AMD的防治有重要的临床意义. 目的 探讨辅酶Q10对体外培养的人RPE细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制. 方法 体外培养人RPE细胞,分为正常对照组(单纯培养基培养)、不同浓度(0.01、1、100 μmol/L)辅酶Q10预处理组和单纯叔丁基过氧化氢(TBHP)处理组,其中各浓度辅酶Q10预处理组以辅酶Q10预处理后暴露于TBHP,光学显微镜下观察各组RPE细胞的形态;用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组RPE细胞活性的变化;Annexin V-FITC/PI染色后用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;TBARS法检测细胞的脂质过氧化水平;用DCFH-DA荧光法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;实时定量PCR法检测RPE细胞中促凋亡基因Fas mRNA的表达;Western blot法检测细胞中Fas蛋白的表达.结果 单纯TBHP处理组RPE细胞贴壁数量较正常对照组明显减少,而0.01、1、100 μmol/L辅酶Q10预处理组贴壁细胞数较单纯TBHP处理组增加,高浓度辅酶Q10预处理组细胞形态的改善和细胞存活的数目更接近正常对照组.与单纯TBHP处理组比较,1μmol/L、100

作者:张丽娟;曲进锋;白玉婧;孙摇遥;于文贞;黄旅珍;黎晓新;赵明威

来源:中华实验眼科杂志 2013 年 32卷 11期

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作者:
张丽娟;曲进锋;白玉婧;孙摇遥;于文贞;黄旅珍;黎晓新;赵明威
来源:
中华实验眼科杂志 2013 年 32卷 11期
标签:
辅酶Q10 视网膜/色素上皮细胞 氧化应激/损伤 凋亡 Coenzyme Q10 Retina/pigment epithelial cell Oxidative stress/injury Apoptosis
背景 有多种因素参与年龄相关性黄斑变性(AMD)的发病,其中视网膜色素上皮(RPE)细胞的氧化应激损伤与AMD的发病密切相关.实验和临床研究表明,辅酶Q10是一种强抗氧化剂,探讨其对人RPE细胞的氧化应激损伤是否有保护作用对于AMD的防治有重要的临床意义. 目的 探讨辅酶Q10对体外培养的人RPE细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制. 方法 体外培养人RPE细胞,分为正常对照组(单纯培养基培养)、不同浓度(0.01、1、100 μmol/L)辅酶Q10预处理组和单纯叔丁基过氧化氢(TBHP)处理组,其中各浓度辅酶Q10预处理组以辅酶Q10预处理后暴露于TBHP,光学显微镜下观察各组RPE细胞的形态;用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组RPE细胞活性的变化;Annexin V-FITC/PI染色后用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;TBARS法检测细胞的脂质过氧化水平;用DCFH-DA荧光法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;实时定量PCR法检测RPE细胞中促凋亡基因Fas mRNA的表达;Western blot法检测细胞中Fas蛋白的表达.结果 单纯TBHP处理组RPE细胞贴壁数量较正常对照组明显减少,而0.01、1、100 μmol/L辅酶Q10预处理组贴壁细胞数较单纯TBHP处理组增加,高浓度辅酶Q10预处理组细胞形态的改善和细胞存活的数目更接近正常对照组.与单纯TBHP处理组比较,1μmol/L、100