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背景 研究表明血小板源性生长因子(PDGF)能调节多种细胞中基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制剂(MMP/TIMP)的表达和平衡,但视网膜色素上皮(RPE)细胞中MMP/TIMP的表达与PDGF作用剂量和作用时间的关系尚不明确. 目的 观察PDGF对RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1表达的影响.方法 体外培养人RPE细胞系ARPE-19,将达到70% ~ 80%融合的细胞分为5个组.分别将0、0.1、1、10、50 mg/L PDGF加入RPE细胞培养基作用36 h,分别采用逆转录PCR(RT-R CR)法和Western blot法检测各组RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA及其蛋白的表达.PDGF组采用10 mg/L PDGF组PDGF分别刺激RPE细胞24、36和48 h,对照组用不含PDGF的培养液培养,采用逆转录PCR(RT-RCR法和Western blot法分别检测RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA及蛋白的表达. 结果 随着PDGF质量浓度的增加和刺激时间的延长,RPE细胞生长速度加快,细胞增生明显.PDGF刺激RPE细胞36 h,随着PDGF质量浓度的增加,MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA在RPE细胞中表达相对值逐渐增加,各组间差异均有统计学意义(MMP-2 mRNA:F=79.304,P=0.000;MMP-9 mRNA:F =-8.465,P=0.003),其中1、10、50 mg/L PDGF组RPE细胞中MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达相对值明显高于0 mg/L PDGF组,差异均有统计学意义(P

作者:聂玉红;瞿雯;邢怡桥;项奕;艾明;江双红;蒋祖林

来源:中华实验眼科杂志 2014 年 32卷 1期

知识库介绍

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作者:
聂玉红;瞿雯;邢怡桥;项奕;艾明;江双红;蒋祖林
来源:
中华实验眼科杂志 2014 年 32卷 1期
标签:
血小板源性生长因子 细胞外基质 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制剂 视网膜 眼色素上皮/细胞学 增生性玻璃体视网膜病变 Platelet-derived growth factor Extracellular matrix Matrix metalloproteinase Tissue inhibitor of metalloproteinase Retina Pigment epithelium of eye/cytology Proliferative vitreoretinopathy
背景 研究表明血小板源性生长因子(PDGF)能调节多种细胞中基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制剂(MMP/TIMP)的表达和平衡,但视网膜色素上皮(RPE)细胞中MMP/TIMP的表达与PDGF作用剂量和作用时间的关系尚不明确. 目的 观察PDGF对RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1表达的影响.方法 体外培养人RPE细胞系ARPE-19,将达到70% ~ 80%融合的细胞分为5个组.分别将0、0.1、1、10、50 mg/L PDGF加入RPE细胞培养基作用36 h,分别采用逆转录PCR(RT-R CR)法和Western blot法检测各组RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA及其蛋白的表达.PDGF组采用10 mg/L PDGF组PDGF分别刺激RPE细胞24、36和48 h,对照组用不含PDGF的培养液培养,采用逆转录PCR(RT-RCR法和Western blot法分别检测RPE细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA及蛋白的表达. 结果 随着PDGF质量浓度的增加和刺激时间的延长,RPE细胞生长速度加快,细胞增生明显.PDGF刺激RPE细胞36 h,随着PDGF质量浓度的增加,MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA在RPE细胞中表达相对值逐渐增加,各组间差异均有统计学意义(MMP-2 mRNA:F=79.304,P=0.000;MMP-9 mRNA:F =-8.465,P=0.003),其中1、10、50 mg/L PDGF组RPE细胞中MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达相对值明显高于0 mg/L PDGF组,差异均有统计学意义(P