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背景 研究表明,转化生长因子β2(TGF-β2)促进Tenon囊成纤维细胞(TFs)的活化,在青光眼滤过术后结膜下纤维化过程中发挥作用,但其作用机制尚未完全明了.赖氨酰氧化酶家族(LOXs)与细胞外基质重塑有关,了解青光眼术后滤过泡的纤维化过程中TGF-β2与LOXs活化的关系对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的防治具有重要意义. 目的 观察TGF-β2对体外培养的人眼TFs中LOXs蛋白表达变化的影响.方法 将培养的第4~8代人TFs分为正常对照组和不同质量浓度TGF-β2培养组,分别在细胞培养液中添加终质量浓度为2、4、8和16 ng/ml TGF-β2继续培养24 h,采用Western blot法测定不同质量浓度TGF-β2培养组细胞中LOXs蛋白表达的变化,确定最适TGF-β2刺激质量浓度.用4 ng/ml TGF-β2分别处理培养的TFs 6、12、24和48 h,采用Western blot法测定各时间点细胞中LOXs蛋白表达的变化.采用细胞免疫荧光法分别检测正常对照组和4 ng/ml TGF-β2培养组TFs中LOX蛋白的表达及其在细胞中的分布. 结果 Western blot 法检测显示,正常对照组及2、4、8和16 ng/ml TGF-β2培养组人TFs中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白的表达强度均随TGF-β2质量浓度的升高而增加,各组间细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3和LOXL4蛋白相对表达量的总体比较,差异均有统

作者:郭凤;朱晓燕;陈侠;张勇;谭燕;吴晓凤;刘锐;李磊;鲜光军;谢琳

来源:中华实验眼科杂志 2017 年 35卷 4期

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作者:
郭凤;朱晓燕;陈侠;张勇;谭燕;吴晓凤;刘锐;李磊;鲜光军;谢琳
来源:
中华实验眼科杂志 2017 年 35卷 4期
标签:
青光眼 滤过手术/不良反应 Tenon囊 成纤维细胞 人 赖氨酰氧化酶 转化生长因子β2/药物作用 细胞培养 Glaucoma Filtering surgery/adverse effects Tenon capsule Fibroblasts Humans Protein-lysine 6-oxidase/metabolism Transforming growth factor beta 2/pharmacology Cells,cultured
背景 研究表明,转化生长因子β2(TGF-β2)促进Tenon囊成纤维细胞(TFs)的活化,在青光眼滤过术后结膜下纤维化过程中发挥作用,但其作用机制尚未完全明了.赖氨酰氧化酶家族(LOXs)与细胞外基质重塑有关,了解青光眼术后滤过泡的纤维化过程中TGF-β2与LOXs活化的关系对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的防治具有重要意义. 目的 观察TGF-β2对体外培养的人眼TFs中LOXs蛋白表达变化的影响.方法 将培养的第4~8代人TFs分为正常对照组和不同质量浓度TGF-β2培养组,分别在细胞培养液中添加终质量浓度为2、4、8和16 ng/ml TGF-β2继续培养24 h,采用Western blot法测定不同质量浓度TGF-β2培养组细胞中LOXs蛋白表达的变化,确定最适TGF-β2刺激质量浓度.用4 ng/ml TGF-β2分别处理培养的TFs 6、12、24和48 h,采用Western blot法测定各时间点细胞中LOXs蛋白表达的变化.采用细胞免疫荧光法分别检测正常对照组和4 ng/ml TGF-β2培养组TFs中LOX蛋白的表达及其在细胞中的分布. 结果 Western blot 法检测显示,正常对照组及2、4、8和16 ng/ml TGF-β2培养组人TFs中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白的表达强度均随TGF-β2质量浓度的升高而增加,各组间细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3和LOXL4蛋白相对表达量的总体比较,差异均有统