目的 观察高糖培养环境下人视网膜血管内皮细胞(HRECs)中载脂蛋白M(ApoM)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的变化,探讨ApoM过表达对高糖诱导的HRECs中TNF-α和MCP-1表达的抑制作用.方法 采用含体积分数10%胎牛血清(FBS)和5.5 mmol/L D-葡萄糖的DMEM培养基培养HRECs后分为6个组.正常对照组细胞进行常规培养,高糖组细胞用含30 mmol/L D-葡萄糖的高糖培养基进行培养,ApoM过表达组用载有ApoM序列的慢病毒载体感染常规培养的细胞,空载组用无ApoM序列的慢病毒载体感染常规培养的细胞,空载+高糖组用高糖培养基培养空载体感染的细胞,ApoM过表达+高糖组用高糖培养基培养ApoM感染的细胞.采用实时荧光定量PCR法检测细胞中ApoM、TNF-α和MCP-1 mRNA相对表达量;采用Western blot法检测细胞中ApoM蛋白相对表达量. 结果 实时荧光定量PCR法检测显示,高糖组细胞中ApoM、TNF-α和MCP-1 mRNA相对表达量明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(t=5.517、3.295、2.555,均P<0.05).HRECs感染慢病毒后生长良好,ApoM过表达组细胞中ApoMmRNA相对表达量为236.400±39.270,明显高于空载组的1.000±0.153,差异有统计学意义(t=5.995,P<0.01),空载组细胞中未见ApoM蛋白表达条带,ApoM过表达组蛋白表达条带较
作者:唐睆;罗光华;姚霜;王敏;潘丽莉;喻妙梅;于洋;刘瑶
来源:中华实验眼科杂志 2018 年 36卷 3期