目的 研究线粒体DNA参与蓝光诱导体外培养的人视网膜色素上皮(hRPE)细胞凋亡的作用机制及与时间的关系.方法 用发光二极管(LED)蓝光光源造成蓝光损伤体外培养的hRPE细胞模型,蓝光辐照度为(4.0±0.5)mW/cm2,并将细胞分为光照0(正常对照组)、0.5、l、2、4、6、12和24 h处理组.免疫荧光染色鉴定人原代hRPE细胞;Western blot法检测caspase-3、cleaved caspase-3、caspase-9、cleaved caspase-9、bax和bcl-2蛋白的表达情况;实时荧光PCR检测线粒体DNA拷贝数;普通PCR检测线粒体DNA 4977bp缺失.结果 分离的细胞呈长梭形、三角形或不规则形,RPE65特异地表达在细胞质中.凋亡蛋白bax从光照后1h显著上调;cleaved caspase-3从光照后2h开始表达水平均显著高于正常对照组;caspase-3、caspase-9和cleavedcaspase-9从光照后4h开始表达水平均显著高于正常对照组;bcl-2从光照后2h开始表达水平均较正常对照组下调,与正常对照组比较凋亡相关蛋白的表达差异均有统计学意义(均P＜0.05).实时荧光PCR检测正常对照组线粒体DNA拷贝数较光照0.5、1、2、4、6、12和24 h处理组降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).普通PCR检测光照0.5、1、2、4、6、12和24 h处理组线粒体DNA 4977bp缺失表达水平高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0

作者：周文杰；俞永珍；徐哲；邹秀兰；李丹丹；邹玉平

来源：中华实验眼科杂志 2018 年 36卷 4期