目的 探讨Krüppel样因子6(KLF6)高表达对于紫外线B(UVB)诱导晶状体上皮细胞(HLECs)凋亡的影响.方法 利用脂质体转染的方法将已成功构建的真核表达质粒pEGFP-C2-KLF6转染到HLECs中,采用Western blot法测定细胞中KLF6蛋白的表达水平;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后细胞活力;经苏木精-伊红染色法观察细胞形态;采用Live/Dead染色法观察细胞受损情况;采用Westernblot法检测细胞中凋亡标志物bax和bcl-2的相对表达量,并计算bax/bcl-2比值;采用细胞凋亡检测试剂盒定量测定细胞凋亡水平,并检测细胞中活性氧簇(ROS)的表达水平. 结果 0.5 μg转染组和1.0 μg转染组细胞生存力较空载体对照组下降,差异均有统计学意义(均P＜0.05).KLF6高表达组细胞稀疏,细胞形态狭长,细胞质浓缩.正常对照组细胞形态稳定,数量均匀,为绿色活细胞;KLF6高表达组红色死亡细胞数量显著增多.UVB照射后,KLF6高表达组HLECs细胞凋亡值、bax相对表达量、bax/bcl-2比值、ROS表达量均高于空载体对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05). 结论 高表达的KLF6通过调控凋亡相关蛋白的表达及促进内质网内ROS堆积来加剧UVB照射导致的HLECs凋亡,提示KLF6参与HLECs的凋亡调控.通过生物学手段特异性下调KLF6的表达有可能在一定程度上发挥对HLECs的保护作
作者：田芳；赵今稚；黄亮瑜；徐墁鸿；张哲；滕贺；张晓敏；李筱荣；东莉洁；张红
来源：中华实验眼科杂志 2019 年 37卷 4期
