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目的 探讨丹参酮ⅡA在缺氧条件下对人视网膜色素上皮(RPE)细胞增生的抑制作用及相关信号通路的影响.方法 体外培养ARPE-19细胞,细胞分为空白对照组、缺氧对照组、不同质量浓度丹参酮ⅡA干预组和缺氧诱导因子1α(HIF-1 α)抑制剂组.利用氯化钴(CoGl2)建立缺氧环境,MTT法检测各组细胞加药培养24、48和72 h后的增生抑制率,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率及细胞周期分布情况,real-time PCR及Western blot法检测各组HIF-1α和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达情况. 结果 MTT法检测结果显示,丹参酮ⅡA可呈时间和质量浓度依赖性地抑制细胞增生,1、5、10 mg/L丹参酮ⅡA组细胞增生抑制率依次升高,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05).流式细胞术检测结果显示,1、5和10 mg/L丹参酮ⅡA组细胞凋亡率依次升高,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05);缺氧对照组、1 mg/L丹参酮ⅡA组、5 mg/L丹参酮ⅡA组、10 mg/L丹参酮ⅡA组G0/G1期细胞比例依次升高,S期细胞比例依次降低,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05).RT-PCR和Western blot检测结果显示,空白对照组、缺氧对照组、1 mg/L丹参酮ⅡA组、5 mg/L丹参酮ⅡA组、10 mg/L丹参酮ⅡA组和HIF-1α抑制剂组中VEGFmRNA、HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白相对表达量的总体比

作者:雷祥;栗占荣;范珂

来源:中华实验眼科杂志 2019 年 37卷 5期

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雷祥;栗占荣;范珂
来源:
中华实验眼科杂志 2019 年 37卷 5期
标签:
丹参酮ⅡA 视网膜色素上皮细胞 缺氧诱导因子1α 血管内皮生长因子 增生 Tanshinone Ⅱ A Retinal pigment epithelial cells Hypoxia-inducible factor-1α Vascular endothelial growth factor Proliferation
目的 探讨丹参酮ⅡA在缺氧条件下对人视网膜色素上皮(RPE)细胞增生的抑制作用及相关信号通路的影响.方法 体外培养ARPE-19细胞,细胞分为空白对照组、缺氧对照组、不同质量浓度丹参酮ⅡA干预组和缺氧诱导因子1α(HIF-1 α)抑制剂组.利用氯化钴(CoGl2)建立缺氧环境,MTT法检测各组细胞加药培养24、48和72 h后的增生抑制率,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率及细胞周期分布情况,real-time PCR及Western blot法检测各组HIF-1α和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达情况. 结果 MTT法检测结果显示,丹参酮ⅡA可呈时间和质量浓度依赖性地抑制细胞增生,1、5、10 mg/L丹参酮ⅡA组细胞增生抑制率依次升高,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05).流式细胞术检测结果显示,1、5和10 mg/L丹参酮ⅡA组细胞凋亡率依次升高,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05);缺氧对照组、1 mg/L丹参酮ⅡA组、5 mg/L丹参酮ⅡA组、10 mg/L丹参酮ⅡA组G0/G1期细胞比例依次升高,S期细胞比例依次降低,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05).RT-PCR和Western blot检测结果显示,空白对照组、缺氧对照组、1 mg/L丹参酮ⅡA组、5 mg/L丹参酮ⅡA组、10 mg/L丹参酮ⅡA组和HIF-1α抑制剂组中VEGFmRNA、HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白相对表达量的总体比