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目的 体外观察脐带间充质干细胞(UCMSCs)对光诱导视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤是否具有保护作用.方法 培养扩增人UCMSCs,对UCMSCs的免疫表型进行流式检测鉴定.原代分离培养人眼RPE细胞,制备蓝光损伤的RPE细胞模型.利用Transwell小室建立光损伤RPE细胞与UCMSCs的非接触共培养体系.RPE细胞分为正常对照组、模型对照组和UCMSCs共培养组.正常对照组不予处理,模型对照组采用蓝光照射诱导RPE细胞损伤,UCMSCs共培养组为光损伤RPE细胞+UCMSCs共培养.光损伤RPE细胞与UCMSCs共培养后24 h和48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组RPE细胞增生活力;共培养48 h,收集各组细胞培养上清液,酶联免疫吸附测定(ELISA)法定量检测色素上皮衍生因子(PEDF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)质量浓度,并进行RPE细胞吞噬感光细胞外节段膜盘(POS)试验.结果 UCMSCs形态呈梭形,细胞表面抗原CD29、CD44、CD90和CD105呈阳性表达,同时细胞表面抗原CD34和CD45呈阴性表达.RPE细胞呈多边形,阳性表达特异性标志物RPE65蛋白.各组共培养后不同时间点RPE细胞增生能力(A值)总体比较,差异均有统计学意义(F组别=132.388,P=0.000;F时间=231.440,P=0.000),其中培养后24 h、48 h,模型对照组和UCMSCs共培养组的细胞A值均较正常对照组明显下降,差异均有统

作者:庄宏;张荣;舒秦蒙;章淑杰;徐格致

来源:中华实验眼科杂志 2019 年 37卷 11期

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作者:
庄宏;张荣;舒秦蒙;章淑杰;徐格致
来源:
中华实验眼科杂志 2019 年 37卷 11期
标签:
视网膜 脐带间充质干细胞 光损伤 视网膜色素上皮细胞 神经营养作用 Retina Umbilical cord mesenchymal stem cells Light damage Retinal pigment epithelial cells Neurotrophic effect
目的 体外观察脐带间充质干细胞(UCMSCs)对光诱导视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤是否具有保护作用.方法 培养扩增人UCMSCs,对UCMSCs的免疫表型进行流式检测鉴定.原代分离培养人眼RPE细胞,制备蓝光损伤的RPE细胞模型.利用Transwell小室建立光损伤RPE细胞与UCMSCs的非接触共培养体系.RPE细胞分为正常对照组、模型对照组和UCMSCs共培养组.正常对照组不予处理,模型对照组采用蓝光照射诱导RPE细胞损伤,UCMSCs共培养组为光损伤RPE细胞+UCMSCs共培养.光损伤RPE细胞与UCMSCs共培养后24 h和48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组RPE细胞增生活力;共培养48 h,收集各组细胞培养上清液,酶联免疫吸附测定(ELISA)法定量检测色素上皮衍生因子(PEDF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)质量浓度,并进行RPE细胞吞噬感光细胞外节段膜盘(POS)试验.结果 UCMSCs形态呈梭形,细胞表面抗原CD29、CD44、CD90和CD105呈阳性表达,同时细胞表面抗原CD34和CD45呈阴性表达.RPE细胞呈多边形,阳性表达特异性标志物RPE65蛋白.各组共培养后不同时间点RPE细胞增生能力(A值)总体比较,差异均有统计学意义(F组别=132.388,P=0.000;F时间=231.440,P=0.000),其中培养后24 h、48 h,模型对照组和UCMSCs共培养组的细胞A值均较正常对照组明显下降,差异均有统