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目的:观察白细胞介素-17A(IL-17A)与γ干扰素(IFN-γ)对Graves眼病(GO)患者CD34 -眼眶成纤维细胞(OFs)的作用,探讨GO的发病机制。 方法:收集5例GO患者眼眶减压术中获取的眼眶脂肪结缔组织以及泪腺组织,采用组织块消化法进行培养和传代。采用免疫磁珠富集其中的CD34 - OFs。将培养的OFs分为转化生长因子-β(TGF-β)组、TGF-β+10 ng/ml IL-17A组和TGF-β+100 ng/ml IL-17A组、TGF-β+1 ng/ml IFN-γ组和TGF-β+5 ng/ml IFN-γ组,在各组细胞培养液中均添加5 ng/ml TGF-β以诱导细胞发生纤维化,按照分组方法分别加入不同质量浓度的IL-17A或IFN-γ。采用Western blot法检测各组眼眶脂肪结缔组织和泪腺组织来源的CD34 - OFs中纤连蛋白、Ⅰ型胶原、ɑ-平滑肌肌动蛋白(ɑ-SMA)和组织金属基质蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)等纤维化相关蛋白表达。 结果:在眼眶脂肪结缔组织来源的CD34 - OFs中,TGF-β+100 ng/ml IL-17A组细胞中纤连蛋白、Ⅰ型胶原、α-SMA和TIMP-1蛋白相对表达量明显高于TGF-β组和TGF-β+10 ng/ml IL-17A组,差异均有统计学意义(均 P<0.05);TGF-β+5 ng/ml IFN-γ组细胞中纤连蛋白、Ⅰ型胶原和α-SMA相对表达量均明显低于TGF-β组和TGF-β+1 ng/m

作者:鲁奕;黄雅琢;李寅炜;吴钰;方思捷;孙静;周慧芳

来源:中华实验眼科杂志 2020 年 38卷 11期

知识库介绍

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作者:
鲁奕;黄雅琢;李寅炜;吴钰;方思捷;孙静;周慧芳
来源:
中华实验眼科杂志 2020 年 38卷 11期
标签:
Graves眼病 成纤维细胞 转化生长因子-β 白细胞介素-17A γ干扰素 纤维化 Graves ophthalmopathy Fibroblast Transforming growth factor-β Interleukin-17A Interferon-γ Fibrosis
目的:观察白细胞介素-17A(IL-17A)与γ干扰素(IFN-γ)对Graves眼病(GO)患者CD34 -眼眶成纤维细胞(OFs)的作用,探讨GO的发病机制。 方法:收集5例GO患者眼眶减压术中获取的眼眶脂肪结缔组织以及泪腺组织,采用组织块消化法进行培养和传代。采用免疫磁珠富集其中的CD34 - OFs。将培养的OFs分为转化生长因子-β(TGF-β)组、TGF-β+10 ng/ml IL-17A组和TGF-β+100 ng/ml IL-17A组、TGF-β+1 ng/ml IFN-γ组和TGF-β+5 ng/ml IFN-γ组,在各组细胞培养液中均添加5 ng/ml TGF-β以诱导细胞发生纤维化,按照分组方法分别加入不同质量浓度的IL-17A或IFN-γ。采用Western blot法检测各组眼眶脂肪结缔组织和泪腺组织来源的CD34 - OFs中纤连蛋白、Ⅰ型胶原、ɑ-平滑肌肌动蛋白(ɑ-SMA)和组织金属基质蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)等纤维化相关蛋白表达。 结果:在眼眶脂肪结缔组织来源的CD34 - OFs中,TGF-β+100 ng/ml IL-17A组细胞中纤连蛋白、Ⅰ型胶原、α-SMA和TIMP-1蛋白相对表达量明显高于TGF-β组和TGF-β+10 ng/ml IL-17A组,差异均有统计学意义(均 P<0.05);TGF-β+5 ng/ml IFN-γ组细胞中纤连蛋白、Ⅰ型胶原和α-SMA相对表达量均明显低于TGF-β组和TGF-β+1 ng/m