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目的:探讨黄连素对高糖培养大鼠离体视网膜Müller细胞的影响及其作用机制。方法:将体外培养的Sprague Dawley(SD)大鼠视网膜Müller细胞分为正常对照组、高糖组、高糖+10 μmol/L黄连素组和高糖+25 μmol/L黄连素组,正常对照组和高糖组细胞分别采用5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L葡萄糖培养,后2个组分别采用25 mmol/L葡萄糖+相应浓度黄连素处理,培养后72 h采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法及实时荧光定量PCR法分别检测细胞培养液上清中炎性因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和环氧合酶2(COX-2),L-谷氨酸-L-天冬氨酸转运体(GLAST)及相关蛋白的表达情况,采用Western blot法检测细胞质中GLAST、镁离子依赖的蛋白磷酸酶1A(PPM1A)、核因子-κB(NF-κB)和cleaved caspase-3及细胞核中NF-κB蛋白的表达情况。结果:正常对照组、高糖组、高糖+10 μmol/L黄连素组和高糖+25 μmol/L黄连素组细胞凋亡率分别为(1.37±0.21)

作者:金轶平;朱皓皓;廖宇洁;于晓彦

来源:中华实验眼科杂志 2020 年 38卷 12期

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作者:
金轶平;朱皓皓;廖宇洁;于晓彦
来源:
中华实验眼科杂志 2020 年 38卷 12期
标签:
Müller细胞 高糖 黄连素 细胞凋亡 炎症 细胞培养 Müller cell Glucose, high concentration Berberine Cell apoptosis Inflammation Cell culture
目的:探讨黄连素对高糖培养大鼠离体视网膜Müller细胞的影响及其作用机制。方法:将体外培养的Sprague Dawley(SD)大鼠视网膜Müller细胞分为正常对照组、高糖组、高糖+10 μmol/L黄连素组和高糖+25 μmol/L黄连素组,正常对照组和高糖组细胞分别采用5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L葡萄糖培养,后2个组分别采用25 mmol/L葡萄糖+相应浓度黄连素处理,培养后72 h采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法及实时荧光定量PCR法分别检测细胞培养液上清中炎性因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和环氧合酶2(COX-2),L-谷氨酸-L-天冬氨酸转运体(GLAST)及相关蛋白的表达情况,采用Western blot法检测细胞质中GLAST、镁离子依赖的蛋白磷酸酶1A(PPM1A)、核因子-κB(NF-κB)和cleaved caspase-3及细胞核中NF-κB蛋白的表达情况。结果:正常对照组、高糖组、高糖+10 μmol/L黄连素组和高糖+25 μmol/L黄连素组细胞凋亡率分别为(1.37±0.21)