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目的 探讨玻璃体腔注射靶向血管内皮生长因子(VEGF)的RNA干扰慢病毒抑制氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜新生血管生成的作用及其机制.方法 实验研究.构建4对针对靶基因小鼠VEGF的siRNA干扰载体,筛选并进行慢病毒包装.60只C57BL/6J小鼠分成4组(每组15只):正常对照组,OIR模型组,OIR+空载体组,OIR+VEGF-RNA干扰组.OIR+空载体组和OIR+VEGF-RNA干扰慢病毒组的小鼠在生后第5天玻璃体腔注射相应的1μl的7.5×107空载体慢病毒和VEGF-RNA干扰慢病毒.后3组小鼠在生后第7天建立OIR模型.第17天时FITC-Dextran灌注视网膜铺片观察4组小鼠视网膜血管形态及面积变化,视网膜铺片免疫荧光染色检测紧密连接蛋白Claudin-5和Occludin的分布变化,Western blot检测VEGF、磷酸肌醇3激酶(PI3K)、酪氨酸蛋白激酶SRC、磷酸化细胞外信号调节激酶( p-ERK)蛋白表达量的变化.数据采用单因素方差分析进行比较.结果 FITC-Dextran灌注视网膜铺片显示正常组视网膜血管分布呈均匀网状;RNA干扰组新生血管面积(0.271 399 mm2)明显较OIR模型组(1.212 782 mm2)、空载体组(1.152 504 mm2)少(F=449.924,P<0.01).OIR模型组和空载体组间差异无统计学意义,其余两两间差异均有统计学意义(P<0.01).视网膜铺片免疫荧光染色显示紧密连接蛋白Claudin-5

作者:毛娅妮;李正原;黄娟;肖伟;陈晓云;凌士奇;项道满

来源:中华眼视光学与视觉科学杂志 2012 年 14卷 1期

知识库介绍

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作者:
毛娅妮;李正原;黄娟;肖伟;陈晓云;凌士奇;项道满
来源:
中华眼视光学与视觉科学杂志 2012 年 14卷 1期
标签:
血管内皮生长因子A RNA干扰 视网膜新生血管化 视网膜病,早产儿 模型,动物 Vascular endothelial growth factor A RNA interference Retinal neovascularization Retinopathy of prematurity Models,animal
目的 探讨玻璃体腔注射靶向血管内皮生长因子(VEGF)的RNA干扰慢病毒抑制氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜新生血管生成的作用及其机制.方法 实验研究.构建4对针对靶基因小鼠VEGF的siRNA干扰载体,筛选并进行慢病毒包装.60只C57BL/6J小鼠分成4组(每组15只):正常对照组,OIR模型组,OIR+空载体组,OIR+VEGF-RNA干扰组.OIR+空载体组和OIR+VEGF-RNA干扰慢病毒组的小鼠在生后第5天玻璃体腔注射相应的1μl的7.5×107空载体慢病毒和VEGF-RNA干扰慢病毒.后3组小鼠在生后第7天建立OIR模型.第17天时FITC-Dextran灌注视网膜铺片观察4组小鼠视网膜血管形态及面积变化,视网膜铺片免疫荧光染色检测紧密连接蛋白Claudin-5和Occludin的分布变化,Western blot检测VEGF、磷酸肌醇3激酶(PI3K)、酪氨酸蛋白激酶SRC、磷酸化细胞外信号调节激酶( p-ERK)蛋白表达量的变化.数据采用单因素方差分析进行比较.结果 FITC-Dextran灌注视网膜铺片显示正常组视网膜血管分布呈均匀网状;RNA干扰组新生血管面积(0.271 399 mm2)明显较OIR模型组(1.212 782 mm2)、空载体组(1.152 504 mm2)少(F=449.924,P<0.01).OIR模型组和空载体组间差异无统计学意义,其余两两间差异均有统计学意义(P<0.01).视网膜铺片免疫荧光染色显示紧密连接蛋白Claudin-5