目的:研究细胞自噬水平改变后,对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)干性标记基因Nanog、Oct-4、Sox-Ⅱ表达的影响。方法:分离培养小鼠BMMSCs,经表型鉴定后,分别利用自噬激活剂雷帕霉素(rapamycin )和靶向作用于 beclin 1的 si-RNA (small interfernce RNA target beclin 1,si-beclin 1)激活或抑制小鼠 BMMSCs 的自噬活性;利用实时定量 PCR 仪(Real-time PCR, RT-PCR)检测各组BMMSCs的各自噬相关基因以及干性标记基因的表达水平。结果:流式细胞仪检测结果显示,小鼠BMMCs中 CD90.2、CD29、SCA-1的阳性率分别为97.4%、97.6%、83.5%,CD31、CD146、CD11b的阳性率分别为2.9%、2.4%、5.6%;雷帕霉素激活BMMSCs自噬后,其干性标记基因Nanog、Oct-4、Sox-Ⅱ的表达均较对照组明显升高(P<0.05),而用si-beclin 1抑制BMMSCs的自噬活性后,Nanog、Oct-4、Sox-Ⅱ的表达均较对照组明显下降(P<0.05)。结论:提高BMMSCs的自噬水平有助于保持干细胞的特异性基因表达。
作者:雒可夫;刘文佳;陈吉华;金岩
来源:牙体牙髓牙周病学杂志 2014 年 5期