目的:探究高迁移率蛋白1(HMGB1)在机械应力诱导的人牙周膜细胞(hPDLCs)迁移中的作用及机制.方法:用Real-time PCR和Western blotting方法检测机械应力(10%形变量、频率0.5 Hz)加载不同时间(0、6、12、24、48 h)对hPDLCs中HMGB1和金属基质蛋白酶2、9(MMP2/9)表达的影响.然后,使用siR-NA干扰技术下调HMGB1,并分别用Transwell检测hPDLCs迁移力、Real-time PCR检测MMPs表达、Westernblotting检测ERK1/2和p-ERK1/2的表达水平.另外,分别使用1μmol/L MMPs抑制剂Batimastat、50 nmol/LERK1/2信号通路抑制剂GDC-0994预处理hPDLCs 2 h,然后再加载机械应力24h,并分别检测细胞迁移或MMPs的表达.结果:hPDLCs经机械应力加载后,其HMGB1、MMP2、MMP9 mRNA和蛋白的表达水平均随着加载时间而逐渐增加,24 h时达到峰值,48 h时呈下降趋势;下调HMGB1能够抑制机械应力诱导的hPDLCs迁移及细胞中MMP2、MMP9和p-ERK1/2的表达;Batimastat能够抑制机械应力诱导的细胞迁移;GDC-0994能够抑制机械应力诱导的MMP2和MMP9的表达.结论:HMGB1介导机械应力诱导的hPDLCs迁移,可能是通过激活ERK1/2信号通路、上调MMPs的表达而发挥作用的.
作者:余小琴;高锦瑜;刘华
来源:牙体牙髓牙周病学杂志 2017 年 27卷 9期