目的:探讨梯度弹性模量固体凝胶诱导牙髓干细胞(DPSCs)向成牙本质细胞分化的特点.方法:原代分离培养和鉴定小鼠DPSCs;利用低熔点琼脂糖与改良EaSe培养基分别配制成弹性模量<25、25 ~ 50、50 ~75、75 ~ 100 kPa 4个梯度的固体凝胶,其所对应的琼脂糖浓度分别为4.8、19.2、76.8、307.2 g/L.将第4代DPSCs分别接种于上述凝胶表面,21 d后用茜素红染色检测其矿化结节的形成情况,RT-PCR和Western Blot检测其牙本质基质蛋白-1(DMPl)、涎蛋白(DSP)、磷蛋白(DPP)的mRNA和蛋白表达水平.结果:流式细胞术鉴定结果表明,所培养细胞高表达间充质干细胞标记蛋白CD29和CD90,几乎不表达造血干细胞标记蛋白CD34和CD45;DPSCs诱导分化结果显示,随着弹性模量增高,固体凝胶表面形成的矿化结节随之增多,同时成牙本质细胞标记基因DMPl、DSP、DPP的mRNA和蛋白质表达水平也逐级增加.结论:DPSCs具有顺培养基质表面硬度梯度逐级向成牙本质细胞分化的特点.
作者:苏小营;李章一;黄建永;姚睿;刘晓智
来源:牙体牙髓牙周病学杂志 2017 年 27卷 11期