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筛选测定HSS体外生物学活性的MTT比色法的最佳实验条件.分析比较不同条件下MTT显色反应的特点,确定适用于人肝癌细胞株SMMC7721的最佳实验条件,并采用优化条件检测不同剂量下HSS的体外生物学活性.结果表明SMMC7721细胞数量与MTT比色法的吸光度成正相关,线性良好.正交实验优化条件为:5×104cells/ml细胞密度,6h后加入HSS,最适浓度为100μg/ml,作用36h后加入MTT溶液.MTT用量50μg,孵育时间6h,DMSO溶解反应产物Formazan,于570nm处测定吸光值.在优化条件下测定HSS体外生物学活性,灵敏度明显高于已发表的方法.一定剂量范围内,活性随剂量增加而增大,超过一定剂量后活性反而下降.应用优化的MTT比色法,以SMMC7221细胞株,检测HSS体外生物学活性是一种灵敏而稳定的方法.

作者:刘昂;郭昱;吴梧桐

来源:药物生物技术 2002 年 9卷 6期

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作者:
刘昂;郭昱;吴梧桐
来源:
药物生物技术 2002 年 9卷 6期
标签:
肝刺激物质 四甲基偶氮唑盐比色法 生物学活性 HSS (Hepatic Stimulator Substance) MTT colorimetric assay Bio-activity
筛选测定HSS体外生物学活性的MTT比色法的最佳实验条件.分析比较不同条件下MTT显色反应的特点,确定适用于人肝癌细胞株SMMC7721的最佳实验条件,并采用优化条件检测不同剂量下HSS的体外生物学活性.结果表明SMMC7721细胞数量与MTT比色法的吸光度成正相关,线性良好.正交实验优化条件为:5×104cells/ml细胞密度,6h后加入HSS,最适浓度为100μg/ml,作用36h后加入MTT溶液.MTT用量50μg,孵育时间6h,DMSO溶解反应产物Formazan,于570nm处测定吸光值.在优化条件下测定HSS体外生物学活性,灵敏度明显高于已发表的方法.一定剂量范围内,活性随剂量增加而增大,超过一定剂量后活性反而下降.应用优化的MTT比色法,以SMMC7221细胞株,检测HSS体外生物学活性是一种灵敏而稳定的方法.