目的 验证超声微泡介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因能否在体内成功转染视网膜神经节细胞(RGCs),是否比传统的转染方式效率高以及这种转染方式是否损伤RGCs.方法 将SD大鼠50只随机分为4组:正常对照组(n=5)、单纯质粒组(n=15)、质粒+超声组(n=15)、超声微泡组(n=15).采用玻璃体腔注射试剂的方法,正常对照组注射5 μl生理盐水；单纯质粒组,注射5μl质粒；质粒+超声组,注射5μl质粒后,立即用0.5 W/cm2超声波辐照大鼠眼球60 s,工作时间控制为1/3(即辐照5s,停10 s,共60 s)；超声微泡组,注射质粒微泡混悬液5 μl后,立即用前述同等能量超声波辐照大鼠眼球.7d后,取大鼠眼球制作视网膜铺片、冰冻纵切片及视网膜EGFPmRNA的RT -PCR.用荧光显微镜观察铺片及切片中EGFP在RGCs的表达情况.用RGCs计数观察RGCs损伤情况[1-2].用RT-PCR对EGFPmRNA进行半定量检测.结果 超声微泡介导EGFP基因转染RGCs的效率明显高于正常对照组、单纯质粒组和质粒+超声组,且对RGCs无明显损伤.结论 在低频超声波的照射下,超声微泡能够在体内安全、有效地介导EGFP基因转染RGCs.
作者：田萍；喻应贵；宇成达；陈鸣；杨蓉
来源：中华眼外伤职业眼病杂志 2011 年 33卷 10期
