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目的检测肿瘤抑制基因p16在胰腺腺癌细胞系中的基因改变和在mRNA以及蛋白质水平的表达.方法使用PCR方法检测基因的缺失情况;使用单链构象多态性(SSCP)方法检测基因有无突变;使用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测基因启动子区域的甲基化状态;使用RT-PCR方法检测基因在mRNA水平的表达;使用免疫细胞化学染色和Western blot方法检测基因在蛋白质水平的表达.结果被检测的6个胰腺腺癌细胞系中,有3个细胞系存在p16基因的纯合性缺失,这3个细胞系在mRNA水平和蛋白质水平均无p16基因的表达.在全部6个细胞系中没有发现p16基因突变和启动子区域的过甲基化.结论在被检测的6个胰腺腺癌细胞系中,纯合性缺失是造成p16基因失表达的原因.

作者:李理;陈杰;高洁;罗玉凤;陈芳

来源:胰腺病学 2001 年 1卷 1期

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作者:
李理;陈杰;高洁;罗玉凤;陈芳
来源:
胰腺病学 2001 年 1卷 1期
标签:
肿瘤抑制基因 p16 胰腺腺癌 纯合性缺失 甲基化
目的检测肿瘤抑制基因p16在胰腺腺癌细胞系中的基因改变和在mRNA以及蛋白质水平的表达.方法使用PCR方法检测基因的缺失情况;使用单链构象多态性(SSCP)方法检测基因有无突变;使用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测基因启动子区域的甲基化状态;使用RT-PCR方法检测基因在mRNA水平的表达;使用免疫细胞化学染色和Western blot方法检测基因在蛋白质水平的表达.结果被检测的6个胰腺腺癌细胞系中,有3个细胞系存在p16基因的纯合性缺失,这3个细胞系在mRNA水平和蛋白质水平均无p16基因的表达.在全部6个细胞系中没有发现p16基因突变和启动子区域的过甲基化.结论在被检测的6个胰腺腺癌细胞系中,纯合性缺失是造成p16基因失表达的原因.