目的 探讨Latexin (Lxn)基因对CD133 MIAPaca-2胰腺癌干细胞增殖的影响.方法 采用磁珠分选法从MIAPaca-2胰腺癌细胞株中分选出CD133+细胞,在无血清培养基中观察其形态变化及种植到裸鼠皮下后的成瘤能力.采用脂质体法将不同浓度的插入Lxn基因(1、3、5μg)的质粒转染CD133+MIAPaca-2胰腺癌细胞.应用RT-PCR及蛋白质印迹法检测转染的癌细胞Lxn mRNA及蛋白表达量.CCK-8法检测转染癌细胞的增殖能力.结果 成功分离出CD13;MIAPaca-2胰腺癌细胞,它以悬浮成球的方式生长,以1 ×105个癌细胞种植裸鼠皮下的成瘤率达100％.转染插入Lxn的质粒后,CD133+MIAPaca-2胰腺癌细胞Lxn基因的表达呈转染剂量依赖性地增加,转染5μg质粒的细胞Lxn mRNA及蛋白表达量分别为20.80±0.98、16.80±2.73,显著高于未转染细胞的1.02 ±0.01、1.01 ±0.01,差异均有统计学意义(P值均＜0.05);转染后癌细胞增殖活性呈转染剂量及培养时间依赖性地被抑制,转染0.4 μg质粒的癌细胞的生长抑制率达36.2％,显著高于未转染细胞的抑制率,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CD133+ MIAPaca-2胰腺癌细胞具有肿瘤干细胞部分特性,Lxn基因转染对CD133+MIAPaca-2胰腺癌干细胞增殖具有抑制作用.
作者：王成；蔡振寨；周羽翙；郑继行；薛战雄
来源：中华胰腺病杂志 2016 年 16卷 1期
