目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对耐吉西他滨的胰腺癌PANC1细胞耐药性的作用和可能机制.方法 采用浓度梯度递增诱导法建立耐吉西他滨PANC1细胞株(PANC1-GR).采用脂质体法将靶向HMGB1的siRNA转染细胞,构建siRNA-HMGB1-PANC1及siRNA-HMGB1-PANC1-GR细胞株.应用CCK-8法检测吉西他滨对4株PANC1细胞的半数抑制浓度(IC50),计算耐药指数(RI).采用蛋白质印迹法检测PANC1和PANC1-GR细胞HMGB1的表达,并检测4株PANC1细胞的自噬标志蛋白Beclin1表达.采用流式细胞术检测4株PANC1细胞凋亡率.结果 成功建立了PANC1-GR细胞株,它在含100 μmol/L吉西他滨的培养液中稳定生长、传代.吉西他滨对PANC1、PANC1-GR、siRNA-HMGB1-PANC1、siRNA-HMGB1-PANC1-GR细胞的IC50值分别为(4.7±0.4)、(166.5±13.6)、(3.2±0.3)、(52.4±8.4) μmol/L,PANC1-GR细胞显著高于PANC1细胞,转染细胞显著低于相应的未转染细胞,差异均有统计学意义(P值均<0.01);未转染细胞和转染细胞RI均值分别为35.4、16.4.PANC1和PANC1-GR细胞HMGB1的蛋白相对表达量分别为0.17 ±0.08和0.38±0.11,PANC1-GR细胞显著高于PANC1细胞,差异有统计学意义(P<0.01).PANC1、PANC1-GR、siRNA-HMGB1-PANC1、siRNA-HMGB1-PANC1-GR细胞Beclin1蛋白相对表达量分别为2.68±0.
作者:陆德文;李先鹏;张波;姜玉华;许丰;郭世伟
来源:中华胰腺病杂志 2018 年 18卷 3期