您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览195 | 下载36

目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对耐吉西他滨的胰腺癌PANC1细胞耐药性的作用和可能机制.方法 采用浓度梯度递增诱导法建立耐吉西他滨PANC1细胞株(PANC1-GR).采用脂质体法将靶向HMGB1的siRNA转染细胞,构建siRNA-HMGB1-PANC1及siRNA-HMGB1-PANC1-GR细胞株.应用CCK-8法检测吉西他滨对4株PANC1细胞的半数抑制浓度(IC50),计算耐药指数(RI).采用蛋白质印迹法检测PANC1和PANC1-GR细胞HMGB1的表达,并检测4株PANC1细胞的自噬标志蛋白Beclin1表达.采用流式细胞术检测4株PANC1细胞凋亡率.结果 成功建立了PANC1-GR细胞株,它在含100 μmol/L吉西他滨的培养液中稳定生长、传代.吉西他滨对PANC1、PANC1-GR、siRNA-HMGB1-PANC1、siRNA-HMGB1-PANC1-GR细胞的IC50值分别为(4.7±0.4)、(166.5±13.6)、(3.2±0.3)、(52.4±8.4) μmol/L,PANC1-GR细胞显著高于PANC1细胞,转染细胞显著低于相应的未转染细胞,差异均有统计学意义(P值均<0.01);未转染细胞和转染细胞RI均值分别为35.4、16.4.PANC1和PANC1-GR细胞HMGB1的蛋白相对表达量分别为0.17 ±0.08和0.38±0.11,PANC1-GR细胞显著高于PANC1细胞,差异有统计学意义(P<0.01).PANC1、PANC1-GR、siRNA-HMGB1-PANC1、siRNA-HMGB1-PANC1-GR细胞Beclin1蛋白相对表达量分别为2.68±0.

作者:陆德文;李先鹏;张波;姜玉华;许丰;郭世伟

来源:中华胰腺病杂志 2018 年 18卷 3期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:195 | 下载:36
作者:
陆德文;李先鹏;张波;姜玉华;许丰;郭世伟
来源:
中华胰腺病杂志 2018 年 18卷 3期
标签:
胰腺肿瘤 细胞系,肿瘤 高迁移率族蛋白质类 自噬 细胞凋亡 吉西他滨 Pancreatic neoplasms Cell line,tumor High mobility group proteins Autophagy Apoptosis Gemcitabine
目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对耐吉西他滨的胰腺癌PANC1细胞耐药性的作用和可能机制.方法 采用浓度梯度递增诱导法建立耐吉西他滨PANC1细胞株(PANC1-GR).采用脂质体法将靶向HMGB1的siRNA转染细胞,构建siRNA-HMGB1-PANC1及siRNA-HMGB1-PANC1-GR细胞株.应用CCK-8法检测吉西他滨对4株PANC1细胞的半数抑制浓度(IC50),计算耐药指数(RI).采用蛋白质印迹法检测PANC1和PANC1-GR细胞HMGB1的表达,并检测4株PANC1细胞的自噬标志蛋白Beclin1表达.采用流式细胞术检测4株PANC1细胞凋亡率.结果 成功建立了PANC1-GR细胞株,它在含100 μmol/L吉西他滨的培养液中稳定生长、传代.吉西他滨对PANC1、PANC1-GR、siRNA-HMGB1-PANC1、siRNA-HMGB1-PANC1-GR细胞的IC50值分别为(4.7±0.4)、(166.5±13.6)、(3.2±0.3)、(52.4±8.4) μmol/L,PANC1-GR细胞显著高于PANC1细胞,转染细胞显著低于相应的未转染细胞,差异均有统计学意义(P值均<0.01);未转染细胞和转染细胞RI均值分别为35.4、16.4.PANC1和PANC1-GR细胞HMGB1的蛋白相对表达量分别为0.17 ±0.08和0.38±0.11,PANC1-GR细胞显著高于PANC1细胞,差异有统计学意义(P<0.01).PANC1、PANC1-GR、siRNA-HMGB1-PANC1、siRNA-HMGB1-PANC1-GR细胞Beclin1蛋白相对表达量分别为2.68±0.