目的 检测胰腺癌组织及BxPC3细胞的miR-34a表达,明确其靶基因,分析miR-34a及其靶基因的表达与胰腺癌临床病理参数的关系以及对BxPC3细胞增殖和转移能力的影响.方法 通过c-MET-3'UTR双荧光素酶报告载体分别克隆c-MET野生型及突变型的3’-UTR,以验证c-MET是miR-34a的靶基因.采用脂质体方法建立过表达miR-34a(miR-34a组)及抑制c-MET表达(c-METsi组)的BxPC3细胞,采用荧光定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学法分别检测miR-34a、c-MET mRNA及蛋白表达.应用CCK-8法及Transwell小室实验检测各组BxPC3细胞增殖及转移能力的变化.结果 miR-34a组细胞c-MET野生型的3’-UTR荧光素酶活性较对照组显著下调[(65.00±4.04)％比100％,P=0.00131)],而c-MET突变型两组间差异无统计学意义,证实c-MET是miR-34a的靶基因.胰腺癌组织miR-34a表达较癌旁正常组织平均下调1.92倍,差异有统计学意义(P =0.003).与对照组比较,miR-34a组细胞c-MET mRNA及蛋白表达显著下降(0.045 ±0.003比0.085±0.001、0.400±0.058比1.133±0.120).培养4d后,miR-34a组和c-METsi组细胞增殖活力较对照组显著下降(P值分别为0.0012、0.0001);穿膜细胞数显著减少(231±12比351±16,P=0.0039;259±7比351±16,P=0.0066),差异均有统计学意义.胰腺癌组织miR-34

作者：倪晨明；邵卓；倪灿荣；熊杰；王欢；胡昊；金钢

来源：中华胰腺病杂志 2018 年 18卷 4期