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目的 研究烟酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyl transferase,Nampt)基因在人胚胎干细胞生长中的作用.方法 采用CRISPR/Cas9技术对人胚胎干细胞H9细胞系的Nampt基因进行移码突变;随后,筛选Nampt基因突变细胞系进行基因测序,同时在显微镜下观察其生长状态.另外,给予H9细胞不同浓度的Nampt抑制剂FK866进行干预,采用CCK-8试剂盒检测细胞活力.结果 Nampt基因发生突变后,人胚胎干细胞会逐渐死亡.同样,Nampt抑制剂FK866也会抑制胚胎干细胞的活力,使细胞逐渐死亡.结论 Nampt 基 因 对 维 持 人 胚 胎 干 细 胞 生 长 具 有 不 可 或 缺 的 重 要作用.

作者:王治;王淑娜;徐添颖;李志勇;张赛龙;缪朝玉

来源:药学实践杂志 2019 年 37卷 3期

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作者:
王治;王淑娜;徐添颖;李志勇;张赛龙;缪朝玉
来源:
药学实践杂志 2019 年 37卷 3期
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烟酰胺磷酸核糖转移酶 胚胎干细胞 CRISPR/Cas9技术 基因编辑
目的 研究烟酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyl transferase,Nampt)基因在人胚胎干细胞生长中的作用.方法 采用CRISPR/Cas9技术对人胚胎干细胞H9细胞系的Nampt基因进行移码突变;随后,筛选Nampt基因突变细胞系进行基因测序,同时在显微镜下观察其生长状态.另外,给予H9细胞不同浓度的Nampt抑制剂FK866进行干预,采用CCK-8试剂盒检测细胞活力.结果 Nampt基因发生突变后,人胚胎干细胞会逐渐死亡.同样,Nampt抑制剂FK866也会抑制胚胎干细胞的活力,使细胞逐渐死亡.结论 Nampt 基 因 对 维 持 人 胚 胎 干 细 胞 生 长 具 有 不 可 或 缺 的 重 要作用.