目的:研究肿瘤的自杀基因疗法,建立含单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSVtk)基因重组逆转录病毒包装细胞PA317/TK. 方法:应用脂质体转移方法将逆转录病毒载体GINaTK导入PA317,经G418筛选阳性克隆细胞后分别用PCR和扫描电镜检测HSVtk基因整合和病毒颗粒分泌情况. 结果:逆转录病毒载体GINaTK导入PA317,G418后筛选得到阳性克隆细胞,命名为PA317/TK. PCR检测 PA317/TK细胞出现一特异性404 bp阳性条带,而 PA317细胞没有扩增出相应条带 .PA317/TK细胞经扫描电镜检测见其表面有颗粒状突起,其周围有许多呈团状的病毒颗粒.证实含HSVtk基因重组逆转录病毒存在于包装细胞中. 结论:成功建立含HSVtk基因重组逆转录病毒包装细胞.
作者:陈道桢;李淑锋;鲁晓萱;王静;苏宁;刘璐;黄鹰;童冠圣;洪泽辉;张丽珊
来源:医学研究生学报 2003 年 16卷 1期