目的：复发和转移是膀胱癌治疗失败的主要原因。文中利用RNA干扰技术使趋化性细胞因子受体CXCR4基因沉默，探讨其沉默对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响。方法设计合成CXCR4的特异性短发卡状RNA （ short hairpin， shRNA），筛选出能够稳定抑制CXCR4表达的细胞，并分为空白对照组、阴性对照质粒组、pshRNA-CXCR4-1实验组， pshRNA-CXCR4-2实验组，应用RT-PCR和免疫荧光分别检测CXCR4 mRNA和蛋白表达水平，应用Boyden小室模型检测体外侵袭能力的变化。将20只裸小鼠随机数表法分为实验裸小鼠和对照裸小鼠，各10只。向实验裸小鼠膀胱内注入100μL ShRNA-EJ-M3，向对照裸小鼠膀胱内注入100μL EJ-M3细胞，检测shRNA-CXCR4对膀胱癌细胞腔内种植能力的影响。结果稳定转染后的pshRNA-CXCR4-1实验组CXCR4 mRNA表达（62．05±1．35）较空白对照组（174．38±1．96）和阴性对照组（166．27±1．82）明显下降（P＜0．05），pshRNA-CXCR4-2实验组CXCR4 mRNA表达水平（182．58±4．2）与空白对照组和阴性对照组比较，差异无统计学意义（P＞0．05）；免疫荧光实验中pshRNA-CXCR4-1实验组红色免疫荧光细胞数（32．24±2．23）较空白对照组（89．61±4．47）和阴性对照组（92．45±3．68）降低（P＜0．05）；pshRNA-

作者：杨德林；霍倩；王乙水；杨旭升；王凯；王剑松；徐鸿毅；王海峰

来源：医学研究生学报 2014 年 10期