目的:耐药是影响宫颈癌患者的化疗效果及预后的主要原因。探讨Twist在低氧微环境中宫颈癌Hela细胞顺铂耐药的作用及可能机制。方法将Hela细胞分无药对照组、常氧A组(不含CoCl2)、低氧A组(加入含终浓度为150μmol/L CoCl2的培养基),6 h后分别向常氧A组、低氧A 组加入不同浓度梯度顺铂(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7 mol/L),24 h后加MTT,测IC50及生长抑制率。以二氯化钴(CoCl2)处理Hela细胞模拟低氧微环境;MTT法筛选低氧条件下顺铂的最适作用浓度及时间;设置常氧B组、顺铂组、低氧B组、低氧顺铂组,免疫荧光法和Western blot 法检测Twist、MDR1的表达情况。结果 MTT结果示:常氧A组顺铂IC50为10-5.3 mol/L,低氧A组顺铂IC50为10-4.5 mol/L。当顺铂浓度≥10-5 mol/L时,常氧A组、低氧A组对Hela细胞抑制率较0 mol/L顺铂差异具有统计学意义(P<0.05),且常氧A组与低氧A组抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。当作用时间≥24 h时,常氧A组、低氧A组对Hela细胞抑制率较0 h时差异具有统计学意义(P<0.05),且常氧A组与低氧A组抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光结果示:顺铂组、低氧B组、低氧顺铂组Hela细胞中Twist蛋白表达(20.81±2.07、24.25±4.51、33
作者:寇蓬;徐勤;杨丽华
来源:医学研究生学报 2015 年 8期