目的 有关色素上皮衍生因子(PEDF)短肽对人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖的研究鲜有报道.文中旨在获得PEDF蛋白的分段克隆表达,并观察对人皮肤鳞状细胞癌细胞系(SCL-1)细胞增殖的影响. 方法 采用PCR扩增PEDF1、PEDF2和PEDF3目的基因,将回收的片段用NheⅠ/HindⅢ酶切,插入至pET28a(+)载体.连接产物转化入大肠埃希菌BL21并诱导表达,并把融合蛋白的进行分离、纯化.采用CCK-8方法检测24 h、48 h及72 h,不同浓度100、400、800和1000 nmol/LPEDF1、PEDF2和PEDF3肽段对SCL-1细胞增殖影响. 结果 成功构建PEDF1、PEDF2和PEDF3的原核表达载体,PEDF1、PEDF2和PEDF3融合蛋白,相对分子质量约为18 000、17 000和13 000.24 h时,800 nmol/L、1000 nmoYL浓度PEDF3 SCL-1细胞增殖[(0.61±0.03)、0.78±0.07)]较0 nmol/L PEDF3 (1.00±0.00)明显降低(P＜0.05);48 h时,400、800、1000nmol/L浓度PEDF3SCL-1细胞增殖呈现显著抑制,并呈剂量依赖性(P＜0.05);72 h时,800、1000 nmol/L浓度PEDF3 SCL-1细胞增殖[(0.53±0.05)、(0.51±0.05)]较400、0 nmol/L[(0.60±0.05)、(1.00±0.00)]显著降低(P＜0.05). 结论 成功分段克隆表达PEDF融合蛋白,PEDF3抑制了SCL-1细胞增殖,为进一步筛选PEDF活性功能短肽提供了基础.

作者：张志彬；彭胜男；刘藕根；张颖鹏；李春明；彭亚婷；张淑兰

来源：医学研究生学报 2019 年 32卷 10期