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目的 目前不同类型细胞对同一种外泌体摄取差异性比较的报道尚不多见,为进一步明确肝癌细胞外泌体的信息转运机制和生物学功能,文中旨在通过研究不同类型细胞对肝癌外泌体摄取的差异,探讨肝癌外泌体对不同肿瘤细胞增殖的影响和对肝细胞的影响.方法 用超高速离心法提取肝癌外泌体并通过透射电镜、BCA、Western blot验证;利用共聚焦显微镜观察不同细胞对肝癌外泌体的摄取情况.应用CCK8检测肝癌外泌体对不同肿瘤细胞增殖的影响;外泌体共培养组:与HepG2外泌体共培养后的肝细胞(hep_ev),取30μg外泌体与1×106个肝细胞共培养48 h;对照组:加入等体积PBS的肝细胞(hep),运用非标记定量蛋白质谱检测样本肝癌相关蛋白表达水平;应用蛋白质谱分析肝癌细胞外泌体对肝细胞的作用.结果 示踪结果显示,HepG2细胞和SMMC7721细胞内的荧光信号较强;K562细胞中可观察到荧光信号(148.50±8.50),较HepG2和SMMC7721(206.76±3.93、214.02±2.45)弱;红细胞内无荧光信号.外泌体共培养组、对照组对HepG2细胞、SMMC7721细胞、K562细胞的增殖无明显差异(P>0.05).与肝癌外泌体共培养后的肝细胞有42种蛋白表达存在差异,其中27种蛋白表达上调,15种蛋白表达下调,PPIA、PSMA1、PARK7、PNP、UBA1、CYCS、TXNRD2、USP5等差异蛋白与肝癌发生发

作者:李佳;王淑芳;蔡晓谕;曹俊宁;李小飞;黄远帅;汪德清

来源:医学研究生学报 2021 年 34卷 2期

知识库介绍

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李佳;王淑芳;蔡晓谕;曹俊宁;李小飞;黄远帅;汪德清
来源:
医学研究生学报 2021 年 34卷 2期
标签:
外泌体 示踪 外泌体摄取 肝细胞
目的 目前不同类型细胞对同一种外泌体摄取差异性比较的报道尚不多见,为进一步明确肝癌细胞外泌体的信息转运机制和生物学功能,文中旨在通过研究不同类型细胞对肝癌外泌体摄取的差异,探讨肝癌外泌体对不同肿瘤细胞增殖的影响和对肝细胞的影响.方法 用超高速离心法提取肝癌外泌体并通过透射电镜、BCA、Western blot验证;利用共聚焦显微镜观察不同细胞对肝癌外泌体的摄取情况.应用CCK8检测肝癌外泌体对不同肿瘤细胞增殖的影响;外泌体共培养组:与HepG2外泌体共培养后的肝细胞(hep_ev),取30μg外泌体与1×106个肝细胞共培养48 h;对照组:加入等体积PBS的肝细胞(hep),运用非标记定量蛋白质谱检测样本肝癌相关蛋白表达水平;应用蛋白质谱分析肝癌细胞外泌体对肝细胞的作用.结果 示踪结果显示,HepG2细胞和SMMC7721细胞内的荧光信号较强;K562细胞中可观察到荧光信号(148.50±8.50),较HepG2和SMMC7721(206.76±3.93、214.02±2.45)弱;红细胞内无荧光信号.外泌体共培养组、对照组对HepG2细胞、SMMC7721细胞、K562细胞的增殖无明显差异(P>0.05).与肝癌外泌体共培养后的肝细胞有42种蛋白表达存在差异,其中27种蛋白表达上调,15种蛋白表达下调,PPIA、PSMA1、PARK7、PNP、UBA1、CYCS、TXNRD2、USP5等差异蛋白与肝癌发生发