目的 通过转染外源性低分子双链RNA(dsRNA) dsP53 ～ 285至人肾癌细胞系ACHN和786-O,观察其激活肾癌细胞中抑癌蛋白野生型P53的表达作用.方法 根据对肾癌细胞的不同处理分为3组,即空白对照(mock)组、阴性对照(转染dsControl)组和实验(dsP53-285)组.荧光实时定量聚合酶链反应(QPCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测P53 mRNA、P21 mRNA和相应蛋白的表达水平.MTT法和集落形成实验检测各组细胞活力及增殖能力.结果 QPCR检测显示dsP53-285能明显促进两种肾癌细胞中P53 mRNA和P21 mRNA水平的升高;与阴性对照组dsControl组相比,dsP53-285分别上调ACHN和786-O细胞中P53 mRNA的表达2.84倍(P＜0.01)和3.20倍(P＜0.01),dsP53-285分别上调ACHN和786-O细胞中P21mRNA的表达2.33倍(P＜0.01)和2.59倍(P＜0.01);mock组与dsControl组相比,两种细胞系中P53 mRNA和P21 mRNA的表达差异均没有统计学意义(P＞0.05).Western blot法检测显示在两种细胞系中,P53蛋白、P21蛋白表达水平的上调与相应的P53 mRNA、P21 mRNA水平的上调一致.MTT检测结果显示,与dsControl组相比,转染dsP53-285后,ACHN和786-O细胞活力显著降低(P＜0.01),mock组与dsControl组无明显差异(P＞0.05).集落形成实验显示,dsP53-285组的集落数数量显著较少(P＜0.0

作者：黄耿；桂定文；姜卫东；叶志华

来源：医学研究杂志 2018 年 47卷 5期