目的 探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)rs805304多态性的最适实验条件.方法 运用PCR-RFLP技术分别对2016年1月~2017年3月昆明医科大学第一附属医院收治的182例2型糖尿病患者和147名健康体检者DDAH2基因rs805304的多态性进行检测,对影响PCR-RFLP方法的主要因素进行研究.结果 最适实验条件:退火温度为58℃,变性温度为95℃,2× Power Taq PCR Master Mix浓度为12.5 μL,引物浓度为0.8 μmo/L,酶切体系为15 μL体系中加8.0 μL产物,用5U的限制性内切酶BstUI消化.结论 最适实验条件的摸索为后续研究奠定了基础.
作者:石柔;董荣静;刘华;李会芳
来源:中国医药导报 2019 年 16卷 2期