目的：观察骨肉瘤细胞分泌的外泌体体外刺激细胞毒性T细胞对骨肉瘤细胞的杀伤作用。方法采用超滤离心联合蔗糖密度梯度超速离心的方法从骨肉瘤细胞培养上清液中分离外泌体( Texo)。透射电子显微镜鉴定Texo形态,western blot分析Texo表面主要组织相容性复合体-Ⅰ( MHC-Ⅰ)类分子表达。分离培养小鼠骨髓来源树突状细胞( DC),流式细胞仪鉴定细胞表型。噻唑蓝( MTT)法检测负载Texo的DC刺激T淋巴细胞增殖情况及效应淋巴细胞对骨肉瘤细胞的杀伤作用。结果透射电镜下见Texo为圆形或类圆形小体,大小不等,平均直径50~100 nm；Texo表面有MHC-Ⅰ类分子表达。骨髓来源DC边缘有绒毛样突起,呈典型的树突状细胞形态,经脂多糖诱导后DC的CD80、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子表达明显高于未经诱导的DC,阳性率分别为77.16
作者：董革辉；刘福慧；韩建华；夏本杰；黄俊琼
来源：医药导报 2014 年 7期
