目的: 探讨兔骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离筛选及扩增的条件,同时观察骨髓细胞体外培养的生物学特性.方法: 无菌条件下采集兔骨髓,肝素抗凝,经淋巴细胞分层液(相对密度为1.077)密度梯度离心分离骨髓单个核细胞,进而贴壁培养,获得MSCs.采用常用细胞培养技术和细胞培养的研究方法,观察不同贴壁时间、不同种植密度、有无包被成分及不同蛋白包被培养板对MSCs生长增殖的影响.结果: 预先蛋白包被培养板有利于MSCs贴壁.在细胞生长和增殖方面,纤粘连蛋白优于明胶和Ⅰ型胶原,以贴壁48～72 h,种植密度(3～9)×104 /ml为最适条件,有利于梭形细胞形态和快速增殖能力的维持,保持成体干细胞的多向分化性.结论: 建立了MSCs体外分离和培养的最适条件,为进一步研究MSCs的诱导分化和应用提供了保证.
作者：何朝荣；张群林；黄从新；王卫民
来源：郧阳医学院学报 2003 年 22卷 1期
