目的:利用大肠杆菌BJ5183细菌内同源重组构建重组腺病毒载体. 方法: 自过氧化氢酶质粒载体pZeoSV2-Cat中酶切出Cat cDNA,亚克隆至质粒pBluescriptⅡsk(+)中,形成pBluescriptⅡsk(+)-Cat,自pBluescriptⅡsk(+)-Cat中酶切出Cat cDNA,亚克隆至腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,形成转移质粒pShuttle-CMV-Cat,在感受态大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,得到重组腺病毒载体pAdEasy-1-Cat.对pAdEasy-1-Cat进行酶切鉴定和PCR鉴定. 结果: 线性化的pShuttle-CMV-Cat转化含pAdEasy-1的超感受态大肠杆菌BJ5183,24 h后获得了30
作者:孙跃玲;王家宁;涂远超;黄永章;黄从新
来源:郧阳医学院学报 2003 年 22卷 4期