目的 探讨Zn2+胁迫下九州虫草Cordyceps kyusyuensis金属硫蛋白(MT)的产生及性质.方法 以培养基中添加ZnSO4的方式,研究九州虫草在Zn2+胁迫下MT的产生规律.通过超声波细胞破碎、提取和凝胶柱色谱法对MT进行分离纯化,利用考马斯亮蓝法进行纯度鉴定.用电喷雾质谱法测定MT的相对分子质量,以Ellman's方法测定巯基的量,以原子火焰吸收法测定Zn的量,以Ag饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)测定MT的量,用氨基酸自动分析仪对Zn-MT进行氨基酸组成分析.通过对羟基自由基(HO·)、DPPH自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除率实验探讨九州虫草MT的抗氧化活性.结果 菌丝体中Zn和MT的量随着培养基中Zn2质量浓度(0～15 g/L)的增加而增加.在10L发酵罐培养时,培养基中Zn2+质量浓度为15g/L,培养时间为56 h,金属硫蛋白的量为14.335 mg/g菌丝体(湿质量).对九州虫草的菌体蛋白通过2次凝胶柱色谱,冷冻干燥得到九州虫草MT,电喷雾质谱法测得其相对分子质量为6750,每分子Zn-MT氨基酸总量为56个,含有20个半胱氨酸,含极少量的芳香族氨基酸,可结合6个Zn原子.九州虫草Zn-MT对于HO·、DPPH·、O2-·有较好的清除作用,清除效果依次为O2-· ＞DPPH·＞HO·,其半数清除率质量浓度(IC50)分别为71.49、80.58、100.65mg/L.结论 通过紫
作者：张琪；程显好；郭文娟；刘凤红；王朝霞
来源：中草药 2013 年 44卷 21期
