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目的 首次合成并鉴定马钱苷(loganin)人工抗原,为进一步制备马钱苷单克隆抗体,建立相关免疫分析方法奠定基础.方法 采用高碘酸钠氧化法合成马钱苷免疫原(loganin-BSA)和包被原(loganin-OVA);应用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法鉴定马钱苷人工抗原是否偶联成功;通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测免疫小鼠血清中抗马钱苷抗体效价及其特异性.结果 经MALDI-TOF-MS检测,马钱苷与BSA偶联成功.竞争抑制曲线表明,血清中的抗体可与马钱苷产生特异性结合,血清抗体效价在1:40 000.结论 成功合成了马钱苷人工抗原,为马钱苷单克隆抗体的制备及其在中药质量评价和动物体内药动学方面的应用奠定了基础.

作者:迪更妮;张维库;李壮;乔灏祎;屈会化;赵琰;王庆国;续洁琨

来源:中草药 2015 年 46卷 19期

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作者:
迪更妮;张维库;李壮;乔灏祎;屈会化;赵琰;王庆国;续洁琨
来源:
中草药 2015 年 46卷 19期
标签:
马钱苷 人工抗原 单克隆抗体 免疫分析法 高碘酸钠法 免疫原 包被原 基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法 酶联免疫吸附试验 抗体效价 loganin artificial antigen monoclonal antibody immunoassay method sodium periodate oxidation method immunogenic antigen coating antigen MALDI-TOF-MS ELISA antibody titer
目的 首次合成并鉴定马钱苷(loganin)人工抗原,为进一步制备马钱苷单克隆抗体,建立相关免疫分析方法奠定基础.方法 采用高碘酸钠氧化法合成马钱苷免疫原(loganin-BSA)和包被原(loganin-OVA);应用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法鉴定马钱苷人工抗原是否偶联成功;通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测免疫小鼠血清中抗马钱苷抗体效价及其特异性.结果 经MALDI-TOF-MS检测,马钱苷与BSA偶联成功.竞争抑制曲线表明,血清中的抗体可与马钱苷产生特异性结合,血清抗体效价在1:40 000.结论 成功合成了马钱苷人工抗原,为马钱苷单克隆抗体的制备及其在中药质量评价和动物体内药动学方面的应用奠定了基础.