目的 克隆茅苍术Atractylodes lancea倍半萜类成分生物合成关键酶法呢基焦磷酸合酶(FPPS)基因全长并分析其表达规律.方法 以茅苍术总RNA为模板,运用同源克隆法和RACE技术克隆茅苍术FPPS基因(AWPPS)的cDNA全长,并进行生物信息学分析;用qRT-PCR和GC-MS分析不同生长阶段FPPS在茅苍术根茎中的表达及倍半萜类成分量变化,并分析二者的相关性.结果 获得AlFPPS基因全长cDNA为1 320 bp (GenBank accession no.KX443242),含一个长1 029 bp的开放阅读框,编码342个氨基酸,包含5个保守功能域,其中2个富含天冬氨酸(DXXDD).qRT-PCR及GC-MS结果显示不同时期茅苍术AIFPPS基因表达量与倍半萜类成分量呈显著正相关.结论 首次克隆获得AIFPPS基因的全长cDNA,初步证明AIFPPS基因是茅苍术倍半萜类成分生物合成途径中的重要调控位点,为茅苍术倍半萜类成分生物合成途径阐明与生物工程应用提供科学依据.
作者:蒋玲;谷巍;巢建国;桑晓华;韩赟;刘青芝;席彩彩
来源:中草药 2017 年 48卷 4期