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目的 探讨葛根素对缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)神经细胞损伤的保护作用及机制.方法 建立氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导的人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH损伤模型,以葛根素进行干预,采用qRT-PCR法检测细胞circ-丝氨酸/苏氨酸蛋白扰动样激酶l(tousled-like kinase1,TLK1)和miR-367-3p mRNA表达情况;采用MTT法检测细胞存活率;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor-a,TNF-a)水平;采用Western blotting检测细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)蛋白表达情况.采用生物信息学在线软件预测miR-367-3p与circ-TLK1、TLR4之间的靶向关系;采用双荧光素酶标记实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)实验验证靶向结合关系.结果 与模型组比较,葛根素能够明显提高OGD诱导的SK-N-SH细胞存活率(P<0.05、0.01、0.001),显著降低细胞凋亡率(P<0.01、0.001),显著降低IL-6和TNF-α水平(P<0.01、0.001).模型组circ-TLK1 mRNA表达水平显著升高(P<0.001),葛根素抑制circ-TLK1 mRNA表达水平(P<0.001),过表达circ-TLK1能够逆转葛根素对OGD诱导的SK-N-SH细胞损伤保护

作者:齐献忠;邢英瀛;张小林;贾燕燕

来源:中草药 2021 年 52卷 11期

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作者:
齐献忠;邢英瀛;张小林;贾燕燕
来源:
中草药 2021 年 52卷 11期
标签:
葛根素 cir-TLK1 miR-367-3p TLR4 缺血性脑卒中 氧糖剥夺
目的 探讨葛根素对缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)神经细胞损伤的保护作用及机制.方法 建立氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导的人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH损伤模型,以葛根素进行干预,采用qRT-PCR法检测细胞circ-丝氨酸/苏氨酸蛋白扰动样激酶l(tousled-like kinase1,TLK1)和miR-367-3p mRNA表达情况;采用MTT法检测细胞存活率;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor-a,TNF-a)水平;采用Western blotting检测细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)蛋白表达情况.采用生物信息学在线软件预测miR-367-3p与circ-TLK1、TLR4之间的靶向关系;采用双荧光素酶标记实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)实验验证靶向结合关系.结果 与模型组比较,葛根素能够明显提高OGD诱导的SK-N-SH细胞存活率(P<0.05、0.01、0.001),显著降低细胞凋亡率(P<0.01、0.001),显著降低IL-6和TNF-α水平(P<0.01、0.001).模型组circ-TLK1 mRNA表达水平显著升高(P<0.001),葛根素抑制circ-TLK1 mRNA表达水平(P<0.001),过表达circ-TLK1能够逆转葛根素对OGD诱导的SK-N-SH细胞损伤保护