目的 探究BRAFV600E突变对结直肠癌细胞甲基化水平、细胞活力、凋亡能力和迁移能力的影响.方法 应用BRAF野生型状态的结直肠癌细胞系SW480作为实验样本,构建BRAFV600E突变质粒和空质粒,脂质体转染进入SW480细胞,将样本分为BRAFV600E突变组、空质粒对照组和空白对照组,采用qPCR法验证转染效果;采用qPCR检测甲基化转移酶DNMT1和DNMT3A的变化;应用Methylight法检测CIMP的变化;应用CCK8实验检测细胞活力;应用TUNEL凋亡实验检测细胞凋亡能力;采用Transwell实验检测细胞迁移能力;应用均值±标准差和t检验进行统计描述和统计推断.结果 处理组过表达BRAFV600E的SW480细胞DNMT1的mRNA的相对表达量显著低于空质粒对照组(P=0.016)和空白对照组(P=0.010),DNMT3A的mRNA的相对表达量显著高于空质粒对照组(P=0.038)和空白对照组(P=0.034),CACNA1G、NEUROG1和CRABP1的甲基化相对表达量显著高于两对照组(P<0.05),CCK8实验处理组细胞吸光值显著高于空质粒对照组(P=0.000)和空白对照组(P=0.000),TUNEL实验处理组细胞凋亡率显著低于空质粒对照组(P=0.000)和空白对照组(P=0.000),Transwell实验各组细胞穿越数无显著差异(P>0.05).结论 BRAFV600E突变能够使DNMT1表达量减少,使DNMT3A表达量增高;使CACNA1G、NEUROG1和CRABP1的甲
作者:刘赛娜;刘航宇;程波;丁姗姗;刘珊;许琳;孙锁柱
来源:诊断病理学杂志 2021 年 28卷 11期