目的:研究正常上皮细胞特异性-1(NES1)基因表达及其CpG岛甲基化状况与胃癌的关系.方法:分别培养胃癌细胞MKN-28(高分化)、SGC-7901、AGS(均中分化)、MKN-45(低分化)、HGC-27(未分化)和原代正常胃上皮细胞.提取细胞RNA,经RT-PCR检测NES1在各细胞株中的表达.以不同浓度DNA去甲基化抑制剂5-aza-dc处理胃癌细胞,RT-PCR检测其NES1 mRNA表达.提取细胞基因组DNA,甲基化修饰后MSP分析其CpG岛甲基化状态.结果:各肿瘤细胞株中NES1 mRNA表达较胃正常上皮细胞有不同程度降低.甲基化检测显示NES1表达减少的胃癌细胞株均存在不同程度的NES1基因外显子3 CpG岛甲基化.NES1表达降低的胃癌细胞株经5-aza-d处理后NES1表达上调.结论:NES1胃癌细胞株中低表达,表达下调与该基因外显子3周围CpG岛甲基化有关.5-aza-dc可使NES1表达降低的胃癌细胞株重新表达NES1 mRNA.提示NES1基因CpG岛甲基化可能是NES1在胃癌细胞系中表达缺失的分子机制.
作者：黄玮；钟捷；吴云林；张一帆；李彪
来源：诊断学理论与实践 2005 年 4卷 6期
