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背景与目的:乙酰肝素酶(heparanase,HPA)是能降解细胞外基质和基底膜的β-D-葡萄糖醛酸内切酶.HPA在人类正常组织局限于胎盘和免疫器官有表达,但在许多恶性肿瘤中有高水平的表达,促进了肿瘤的侵袭和转移.本文探讨乙酰肝素酶基因转染卵巢癌SKOV3细胞后对细胞生长、黏附、侵袭能力的影响.方法:以携带HPA基因的质粒(pCDNA3.0-HPA)经脂质体介导转染SKOV3细胞.RT-PCR法检测转染后HPA mRNA表达水平;MTT法检测SKOV3细胞生长曲线及细胞与细胞外基质的黏附;同质黏附试验和细胞分离试验检测细胞间的黏附和分离能力;利用transwell小室检测卵巢癌细胞SKOV3细胞的侵袭能力;流式细胞仪测细胞周期;免疫组化法检测卵巢癌细胞中HPA蛋白表达.结果:与对照组和空载组比较,转染组HPA mRNA水平上调,差异有显著性(t=-128.726,-96.959,P<0.01);细胞周期中S期指数明显增多;细胞生长曲线显示细胞生长速度增快;对细胞外基质的黏附率明显升高(t=11.824,11.234,P<0.01);同质黏附率降低(t=-14.455,-18.348,P<0.01);细胞分离率增强(x2=869.847b,796.068b,P<0.01);穿透重组基底膜的细胞数目显著增高(t=11.964,12.263,P<0.01);细胞浆中的HPA蛋白表达显著上升.结论:转染HPA基因可以促进卵巢癌细胞的生长增值,增强卵巢癌细胞的侵袭转移

作者:毛敬;辛哓燕;刘玉;李萍

来源:中国癌症杂志 2006 年 16卷 1期

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作者:
毛敬;辛哓燕;刘玉;李萍
来源:
中国癌症杂志 2006 年 16卷 1期
标签:
乙酰肝素酶 转染 卵巢癌 侵袭 培养的肿瘤细胞
背景与目的:乙酰肝素酶(heparanase,HPA)是能降解细胞外基质和基底膜的β-D-葡萄糖醛酸内切酶.HPA在人类正常组织局限于胎盘和免疫器官有表达,但在许多恶性肿瘤中有高水平的表达,促进了肿瘤的侵袭和转移.本文探讨乙酰肝素酶基因转染卵巢癌SKOV3细胞后对细胞生长、黏附、侵袭能力的影响.方法:以携带HPA基因的质粒(pCDNA3.0-HPA)经脂质体介导转染SKOV3细胞.RT-PCR法检测转染后HPA mRNA表达水平;MTT法检测SKOV3细胞生长曲线及细胞与细胞外基质的黏附;同质黏附试验和细胞分离试验检测细胞间的黏附和分离能力;利用transwell小室检测卵巢癌细胞SKOV3细胞的侵袭能力;流式细胞仪测细胞周期;免疫组化法检测卵巢癌细胞中HPA蛋白表达.结果:与对照组和空载组比较,转染组HPA mRNA水平上调,差异有显著性(t=-128.726,-96.959,P<0.01);细胞周期中S期指数明显增多;细胞生长曲线显示细胞生长速度增快;对细胞外基质的黏附率明显升高(t=11.824,11.234,P<0.01);同质黏附率降低(t=-14.455,-18.348,P<0.01);细胞分离率增强(x2=869.847b,796.068b,P<0.01);穿透重组基底膜的细胞数目显著增高(t=11.964,12.263,P<0.01);细胞浆中的HPA蛋白表达显著上升.结论:转染HPA基因可以促进卵巢癌细胞的生长增值,增强卵巢癌细胞的侵袭转移