背景与目的:肿瘤血管作为肿瘤分子靶向治疗的靶点受到广泛的关注,近年来有报道称利用抗体(Ab)作为组织因子(TF)胞外区截短组织因子(truncated tissue factor,tTF)的载体,表达的抗体--截短组织因子(Ab-tTF)融合蛋白能够选择性结合肿瘤血管,诱发实体肿瘤组织血管栓塞,导致肿瘤衰退,但是该方法存在一些弊端.本实验旨在研究以精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(GRGDSP,RGD)多肽作为tTF载体所表达的(RGD)_3-tTF融合蛋白选择性结合结肠癌裸鼠模型肿瘤血管的能力.方法:用3个串联的RGD多肽与tTF合成融合基因(RGD)_3-tTF,表达于大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE_3),用镍柱纯化融合蛋白.用RGD-tTF融合蛋白作对照,通过凝血实验和凝血因子X(FX)活化实验检测(RGD)_3-tTF融合蛋白的凝血活性,运用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分析其特异性结合肿瘤血管标志物整合素α_vβ_3的能力.结肠癌裸鼠模型分为3组(每组1只),肿瘤组织分别用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的(RGD)_3-tTF、RGD-tTF融合蛋白、tTF进行荧光染色,免疫荧光实验分析融合蛋白在结肠癌裸鼠模型组织的定位.结果:(RGD)_3-tTF融合蛋白保留了组织因子的凝血活性,在Ca~(2+)存在时随着融合蛋白浓度的增加,凝血时间相应缩短,浓度为6 μ mol/L时,凝血时间为(9.96±0.5
作者：黄正接；罗琪；颜江华；王生育
来源：中国癌症杂志 2009 年 19卷 10期
