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背景与目的:肿瘤血管生成是肿瘤的一大重要特性,肿瘤微血管密度已被作为许多恶性肿瘤预后的一个重要指标.分化抑制因子(Id)是新近发现的与血管生成密切相关的分子.Id1是Id因家族中研究较多的基因,在促进肿瘤的转移和血管生成中发挥重要的作用.本文研究胃癌中Id1蛋白的表达及其对基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)表达的影响.方法:采用免疫组织化学方法检测Id1及MMP-2、MMP-9在胃癌组织中的表达;采用RT-PCR和western blot方法检测转染Id1特异性小干扰RNA(Id1-siRNA)的SGC7901细胞中删P-2和MMP-9的表达,并用明胶酶谱实验进一步检测Id1-siRNA细胞中MMP-2、MMP-9的活性;采用免疫组织化学方法和Western blot检测Id1-siRNA细胞和空载体转染细胞在裸鼠体内成瘤组织中MMP-2、MMP-9的表达;利用删PsELISA试剂盒检测不同处理组细胞上清液中MMP-2、MMP-9的含量.结果:免疫组织化学结果显示,在胃癌组织中Id1和MMP-2、MMP-9呈共表达;成功建立表达特异性Id1-siRNA细胞系,Western blot和RT-PCR结果提示不同克隆的转染效率不同;转染Id1-siRNA的SGC7901细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白及mRNA表达水平均低于对照组;明胶酶谱实验显示,Id1-siRNA细胞组的MMP-2、MMP-9的活性较对照细胞组下降;Id1-siRNA细胞处理后的裸鼠体内成瘤组织

作者:雷婷;韩霜;郭雪艳;丁杰

来源:中国癌症杂志 2011 年 7期

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作者:
雷婷;韩霜;郭雪艳;丁杰
来源:
中国癌症杂志 2011 年 7期
标签:
胃癌 调控作用 基质金属蛋白酶 Id1
背景与目的:肿瘤血管生成是肿瘤的一大重要特性,肿瘤微血管密度已被作为许多恶性肿瘤预后的一个重要指标.分化抑制因子(Id)是新近发现的与血管生成密切相关的分子.Id1是Id因家族中研究较多的基因,在促进肿瘤的转移和血管生成中发挥重要的作用.本文研究胃癌中Id1蛋白的表达及其对基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)表达的影响.方法:采用免疫组织化学方法检测Id1及MMP-2、MMP-9在胃癌组织中的表达;采用RT-PCR和western blot方法检测转染Id1特异性小干扰RNA(Id1-siRNA)的SGC7901细胞中删P-2和MMP-9的表达,并用明胶酶谱实验进一步检测Id1-siRNA细胞中MMP-2、MMP-9的活性;采用免疫组织化学方法和Western blot检测Id1-siRNA细胞和空载体转染细胞在裸鼠体内成瘤组织中MMP-2、MMP-9的表达;利用删PsELISA试剂盒检测不同处理组细胞上清液中MMP-2、MMP-9的含量.结果:免疫组织化学结果显示,在胃癌组织中Id1和MMP-2、MMP-9呈共表达;成功建立表达特异性Id1-siRNA细胞系,Western blot和RT-PCR结果提示不同克隆的转染效率不同;转染Id1-siRNA的SGC7901细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白及mRNA表达水平均低于对照组;明胶酶谱实验显示,Id1-siRNA细胞组的MMP-2、MMP-9的活性较对照细胞组下降;Id1-siRNA细胞处理后的裸鼠体内成瘤组织