目的：探讨问号赖型钩端螺旋体重组质粒pDL121外源基因及其表达产物23 kDa蛋白的特点。方法：用6种内切酶对pDL121行酶谱分析，用Digoxin标记的pDL121外源基因片段作探针对不同种属的钩体进行杂交，用SDS-PAGE制备23 kDa蛋白，Western blot鉴定其免疫原性。结果：pDL121外源基因没有6种内切酶的酶切位点，重组探针与致病性钩体(serovar lai strain 017，serovar hebdomadis strain 56610，serovar pomona strain 56608)有杂交信号，与非致病性钩体(serovar patoc strain Patoc I，serovar illini strain 3055)无杂交信号，亦不识别大肠杆菌。23 kDa兔抗血清可识别pDL121体外表达的23 kDa蛋白带和赖型钩体017株超声抗原成份；其抗体滴度为1／12800；用pDL121细菌裂解液主动免疫豚鼠，可使豚鼠抵抗强毒力株钩体攻击。结论：pDL121外源基因可能是赖型钩体的一个新基因；该重组探针能鉴别致病性钩体和非致病性钩体；23 kDa抗原有良好的免疫原性，可能是赖型钩体017株的保护性抗原。
作者：刘洪斌；戴保民；章涛；李胜富；方之茂
来源：中国病理生理杂志 2000 年 16卷 12期
