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目的: 获得人精子蛋白SP17基因(hSP17),构建重组表达载体并在大肠杆菌中表达.方法: 获取人睾丸组织,提取总RNA,通过RT-PCR获得hSP17的全长cDNA;将该cDNA克隆入TA载体,并亚克隆进融合蛋白型重组表达载体pGEX-3b;转化大肠杆菌DH5α并诱导表达之.结果: 获得了全长hSP17的cDNA,构建了重组表达子hSP17/pGEX-3b,获得了预期大小的融合蛋白hSP17-GST的表达.结论: 通过构建重组表达质粒hSP17/pGEX并转化大肠杆菌,获得了融合蛋白hSP17-GST的高效表达.

作者:王敏珍;刘志成;高展;郑文波;罗建红

来源:中国病理生理杂志 2001 年 17卷 10期

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作者:
王敏珍;刘志成;高展;郑文波;罗建红
来源:
中国病理生理杂志 2001 年 17卷 10期
标签:
人类 精子 蛋白质类 基因
目的: 获得人精子蛋白SP17基因(hSP17),构建重组表达载体并在大肠杆菌中表达.方法: 获取人睾丸组织,提取总RNA,通过RT-PCR获得hSP17的全长cDNA;将该cDNA克隆入TA载体,并亚克隆进融合蛋白型重组表达载体pGEX-3b;转化大肠杆菌DH5α并诱导表达之.结果: 获得了全长hSP17的cDNA,构建了重组表达子hSP17/pGEX-3b,获得了预期大小的融合蛋白hSP17-GST的表达.结论: 通过构建重组表达质粒hSP17/pGEX并转化大肠杆菌,获得了融合蛋白hSP17-GST的高效表达.