目的:建立D-半乳糖致原代培养神经元损伤模型,为筛选益智药物提供药效学研究方法.方法:在原代培养神经元的第6 d,加入50mmol/L D-半乳糖作用72h,倒置显微镜下观察神经元的生长发育形态,MTT法在酶联免疫检测仪上检测神经元代谢率,PI染色在流式细胞仪上检测神经元凋亡率,HE染色观察神经元形态、形态计量神经突起密度,RT-PCR检测醛糖还原酶信使RNA(AR-mRNA)含量.比较正常对照神经元和受D-gal攻击神经元之间的差别.结果:受D-半乳糖攻击神经元的生长发育显著迟缓;代谢率从0.762±0.030(n=33)降低到0.543±0.064(n=11),P<0.01;凋亡率从0.060±0.029(n=19)增高到0.356±0.215(n=19),P<0.01;出现变性坏死的形态变化,神经突起密度从0.557±0.042(n=10)降低到0.468±0.033(n=10),P<0.01;无AR-mRNA的表达.结论:用D-半乳糖建立的原代培养神经元损伤模型稳定、观察指标敏感,可用于老年性痴呆等神经系统疾病的研究.
作者:蔡大勇;赵雁;黄启福
来源:中国病理生理杂志 2002 年 18卷 7期